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目的:研究六味地黄丸、三分三浸膏对去卵巢大鼠吗啡耐受形成和运动敏化的影响,以及对去卵巢大鼠脑组织各区雌激素受体(ERα、ERβ)表达和NOS阳性神经元表达的影响。
方法:建立吗啡耐受模型,每日两次皮下注射吗啡10mg/kg,共七天,期间用热甩尾和压后足实验测定痛阈。自发运动测量采用视频图象跟踪技术,在此基础上进行吗啡运动敏化实验,慢性给药停药一周后,给予10mg/kg吗啡皮下注射激发并记录大鼠活动度。用免疫组化方法检测大鼠脑组织中ERα、ERβ的表达。应用NADPH-d方法检测大鼠脑组织中NOS的表达。
结果:大鼠卵巢摘除后体重上升,六味地黄丸、三分三浸膏可以降低这种体重上升,可以使去卵巢大鼠子宫重量增加,使其大部分处于动情前期或动情期。雌性大鼠去卵巢后吗啡耐受形成时间缩短,六味地黄丸、三分三浸膏可以部分逆转吗啡耐受形成。去卵巢手术处理减弱大鼠吗啡运动敏化,给予外源性雌二醇处理后,不易形成吗啡运动敏化,三分三浸膏大剂量处理可以部分恢复吗啡运动敏化。去卵巢后大鼠ERα表达在pv、ar、Nac、vmh区明显减少,给予雌二醇替代治疗后ERα表达明显增多(P<0.05);与手术组相比,六味地黄丸处理后ERα表达明显减少(P<0.05),三分三浸膏组无明显变化。去卵巢手术组大鼠ERβ表达在Nac区明显减少,六味地黄丸处理使ERβ在Nac区表达减少(P<0.05);与假手术组大鼠相比,三分三浸膏组大鼠ERβ在Nac区表达明显减少(P<0.05)。与手术组大鼠相比,去卵巢大鼠给予雌二醇处理后,ACa区NOS阳性神经元数量明显增加(P<0.05)。去卵巢手术后大鼠CG区NOS阳性神经元数量减少,三分三浸膏处理后(小剂量组和大剂量组)CG区NOS阳性神经元数量明显增加(P<0.05)。
结论:
1.去卵巢手术处理可以增强大鼠吗啡镇痛耐受的形成,慢性给予雌激素、六味地黄丸、三分三浸膏具有逆转作用。
2.去卵巢后大鼠吗啡运动敏化作用减弱,这种减弱可以被大剂量三分三浸膏部分逆转,而雌激素处理阻断吗啡运动敏化的形成。
3.六味地黄丸调节ER(ERα、ERβ)在去卵巢大鼠脑组织中的表达,有类雌激素样作用。提示六味地黄丸可能通过调节下丘脑-垂体-性腺轴的功能减轻吗啡依赖。
4.吗啡处理后去卵巢大鼠脑区内NOS阳性神经元的表达减少,而雌激素和三分三浸膏处理可以增加NOS阳性神经元的表达。