固定化酶酶促转化生产L-酒石酸及盐

• 作 者: 苏牧楠
• 出 处: 河北大学
• 发表日期: 2016年期
• 关键词: 顺式环氧琥珀酸水解酶 固定化酶 L-酒石酸 离子交换 酶促转化

顺式环氧琥珀酸水解酶是一种环氧化合物水解酶(Epoxide Hydrolases),能选择性地将水分子加到环氧底物上生成1,2-二醇。而固定化ESH可提高酶的稳定性,故在酶的催化中较为常见。L-酒石酸是一种天然有机酸,可用于食品添加剂和医药行业。本文主要研究固定化ESH的催化性质及动力学性质,研究了琼脂糖固定化ESH生产L-酒石酸盐以及L-酒石酸的酶促生产和离子交换对L-酒石酸的清洁生产。1.固定化ESH的催化性质及动力学研究比较游离ESH和固定化ESH在对底物进行催化时,温度、pH、转速对其的影响以及稳定性,相对于游离ESH,固定化ESH在温度和转速上得到提高。而在pH上,游离ESH高于固定化ESH。确定了最适反应温度为37℃,最适pH为8,最适反应转速为150r/min。通过实验,计算游离ESH的Vmax=2.595 mM/min和Km=35.71 mM,固定化ESH的Vmax=1.637 mM/min和Km=34.27 mM2.固定化ESH酶促转化生产L-酒石酸钾钠将ESH固定在琼脂糖介质上,催化生产L-酒石酸钾钠,使用的层析柱填料体积为10 mL,径高比为1:2.5,确定了最佳流速为5 mL/min,考察了固定化ESH的催化能力,并对固定化ESH进行洗脱和再生,仍可保持一定的催化能力。3.L-酒石酸的酶促生产及离子交换的应用通过001×7阳离子交换树脂对Na+的吸附,将L-酒石酸钠转变为L-酒石酸,通过实验计算出树脂的静态吸附量为45.91 mg/g,动态吸附量为50.93 mg/g。阳离子交换树脂对0.5 mol/L的L-酒石酸钠的吸附效果最好。离子交换法可清洁生产L-酒石酸。