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背景：肝细胞癌(HCC)是我国及亚非地区常见的恶性肿瘤之一，流行病学调查发现数百万HCC患者合并有乙型肝炎病毒(HBV)的感染，而HBV患者发生HCC的几率比非HBV患者高100倍。大量证据证明HBV感染是HCC发生的重要原因。HBV属于嗜肝DNA病毒，编码HBV X蛋白（HBxAg）、表面抗原（HBsAg）、核心抗原（HBcAg）和DNA聚合酶。HBV X基因编码154个氨基酸残基的 X蛋白，具有广泛的反式激活作用，在 HBV的复制和表达中起重要作用。在HBV相关肝癌形成机制的研究中，HBx的致癌作用日益受到重视，HBx在HCC形成的多个环节发挥作用，目前研究普遍认为HBx通过打破癌基因与抑癌基因平衡、作用于肝细胞内生存信号级联通路、调节肝细胞凋亡、干扰DNA损伤修复机制、激活肝癌细胞端粒酶等途径最终导致HCC的发生。另外，HBx通过对细胞外基质和细胞粘附分子的作用、促进肿瘤组织中新生血管的生成等方式促进HCC的侵袭和转移。HCC的发生是一个长期而缓慢的过程，因此，据上述推测，HBx的表达对HBV复制和乙肝患者病程进展有重要的影响作用。 目的：研究血清 HBx、HBV-M、HBV-DNA在乙肝患者中的分布情况，为监测乙肝患者病情状况、临床诊断HBV相关肝癌提供实验依据。 方法：根据2005年病毒性肝炎防治方案诊断标准，将169例乙肝患者分为慢性乙肝78例，乙肝肝硬化53例，乙肝肝癌38例；健康对照组20例；以HBeAg阳性59例，HBeAg阴性110例分为两组；以HBV DNA拷贝数(copies/ml)<103、103≦HBV DNA<105、105≦HBV DNA<107、HBV DNA≧107分别是7例、66例、54例、42例分为四组。所有入选患者以无菌操作取新鲜血液4ml。标本离心后分离血清置EP管，放入-70℃低温冰箱保存。ELISA检测HBV血清标志物；采用罗氏C8000型全自动生化分析仪检测肝功能指标（ALT、AST、ALB及TBIL）。 结果： 1. HBxAg在HBeAg（+）组的阳性检出率高于HBeAg（-）组，前者为57.6％（34/59），后者为19.1%（21/110），差异具有统计学意义。 2.HBV感染者血清中HBxAg检出率随HBV DNA拷贝数的增加呈上升趋势，随HBV DNA拷贝数指数级数增加，HBV DNA拷贝数≧107的病例组内HBxAg阳性率较其它三组的高，差异具有显著统计学意义。 3.乙肝肝硬化组和乙肝肝癌组患者血清中HBxAg阳性检出率明显高于慢乙肝组，乙肝肝硬化组、乙肝肝癌组与慢乙肝组比较差异具有统计学意义；20例对照组HBxAg检测均为阴性。 结论： 1.HBV感染是HBV相关肝癌发生发展的一个主要危险因素，HBV相关肝癌的发生是一个多阶段的病理学过程，而HBx可能在此过程通过其特有的反式激活作用和信号转导途径诱导肝细胞癌的形成。 2.HBx在HBV复制和HBV相关肝癌的发生中起促进作用，为研究HBV相关肝癌的发病机制提供了一个新的视角。 3.HBx的表达能加重乙肝患者病情，趋向肝硬化、肝癌发展，对HBV相关肝癌的诊断具有一定的临床意义。 背景：MicroRNAs(miRNAs)是一种大小约21-23个碱基的单链小分子非编码RNA，它在转录后水平调节靶基因表达，在真核基因表达调控中有着广泛的作用。研究表明其在细胞发育、细胞增殖、细胞凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中发挥重要作用。miR-143定位于大约距染色体5q3218000 bp处，最初在鼠体内被检测出。目前研究表明 miR-143的异常表达在人类多种恶性肿瘤发生发展起着重要作用，因此 miR-143可能是普遍的肿瘤相关性 miRNA(oncogenie miRNA)。肝细胞癌(HCC)是全球常见的恶性肿瘤之一。其最重要的病原学因素是乙型肝炎病毒(HBV)，HBV感染是患者最终发展成HCC的一个主要危险因素。大量研究表明其HBV X蛋白(HBx)在乙肝相关肝癌的发生过程中起十分关键的作用。既往研究者多采用 p21-HBx转基因小鼠来研究 miRNAs在HBx相关的HCC发生发展中作用机制，将p21-HBx转基因小鼠与野生型小鼠对比分析，发现 miR-143在10月龄的转基因小鼠肝脏中的表达水平明显降低，但在22月龄的转基因小鼠肝脏中的表达水平明显上升，特别是那些伴随机体其它部位癌转移的转基因小鼠，miR-143上调水平更显著；Budhu等研究发现在乙肝相关肝病病例中 miR-143水平在肝脏中没有发生变化，特别是 HBV相关肝硬化的病例中， miR-143的表达水平较正常肝组织没有显著变化；而 Murakami等却报道 miR-143在慢性肝炎病人肝组织中下调，而在肝硬化病人肝组织中上调。基于上述研究推测， miR-143通过对靶基因的调控调节细胞的分化、增殖和凋亡，参与了肿瘤细胞的侵袭、转移，在乙肝肝癌的发生发展中起着重要作用。 目的：探讨miR-143在HBV相关肝癌的影响作用；研究乙肝肝病患者血清中miR-143表达水平与血清HBV DNA、AFP、ALT定量水平的关系，探讨其在HBV相关肝癌患者中的价值，为HBV相关肝癌临床治疗方案的选择提供有效的分子标志物。 方法：随机选取2013年10月-2014年10月广州医科大学附属第二医院和广东省人民医院乙型肝炎患者共计169例，健康对照组20例，且入选患者均被告知并签署知情同意书。其中慢性乙型肝炎78例，乙肝肝硬化53例，乙肝肝癌38例。所有患者诊断均符合2005年12月中华医学会肝病学分会和中华医学会感染病学分会联合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》。采用荧光定量PCR检测血清miR-143和HBV DNA。ELISA检测乙肝血清标志物（HBV-M）。化学发光免疫分析技术定量检测血清AFP水平。罗氏C8000全自动生化分析仪检测肝功能指标（ALT）。 结果： 1.乙肝肝癌组miR-143相对表达量为4.23±1.08较乙肝肝硬化组2.37±0.97、慢乙肝组1.21±0.58及正常对照组1.53±0.36显著升高，且miR-143相对表达量随着病程进展有升高趋势；慢乙肝组患者血清 miR-143相对表达量与正常对照组比较，差异不具有统计学意义。 2.血清miR-143表达水平在TNM分期Ⅲ期的乙肝肝癌患者较Ⅰ期-Ⅱ期患者相对表达量高；与患者年龄、性别、肿瘤大小、癌栓比较，差异不具有统计学意义。 3.血清miR-143、HBV DNA、AFP在乙肝肝癌患者的表达量显著高于其他三组，乙肝肝癌、乙肝肝硬化及慢乙肝组中ALT表达量显著高于正常对照组，ALT表达量在乙肝肝癌、乙肝肝硬化及慢乙肝组间两两比较没有显著差异。 4.乙肝肝癌患者中血清miR-143与HBV DNA水平呈正相关；与血清中ALT水平呈正相关；与血清中AFP水平呈正相关。 结论： 1．血清miR-143在乙肝肝癌患者中呈高水平表达，提示血清miR-143与HBV相关肝癌的发生有密切关系。 2．血清miR-143表达量与乙肝肝癌的TNM分期有关，可能是转移性肝癌的重要预后因素。 3．血清miR-143表达水平与病毒复制指标HBV DNA具有正相关性，与血清AFP表达量呈正相关性，而HBV感染是HBV相关肝癌发生发展的一个主要危险因素，对HBV相关肝癌的发生发展起着重要作用。 4．乙肝肝癌患者血清miR-143表达水平与血清ALT有很好的相关性，可作为潜在指标用于评估乙肝患者肝损伤程度。