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目的:1.探讨HBs Ag阳性母亲服用替比夫定对HBV母婴传播的阻断疗效及不良结局的比较;2.从细胞免疫水平方面讨论HBs Ag阳性母亲服用替比夫定与新生儿、婴儿外周血免疫细胞的关系研究方法:1.运用双向性队列研究的方法,选取2011年7月-2013年7月在山西省太原市第三人民医院妇产科生产的HBs Ag阳性且HBV DNA≥106拷贝/m L的孕妇及其新生儿130对作为研究对象。通过对HBs Ag阳性母亲进行基线资料收集(包括一般情况、流行病学资料、替比夫定使用情况等),根据药物使用情况,将HBs Ag母亲分为暴露组(服用替比夫定)和对照组(未服用替比夫定),于分娩前采集母亲肘静脉血5m L。两组孕妇所分娩的新生儿于出生后24小时内(主、被动免疫前)采集其股静脉血3m L,按照0,1,6月免疫接种方案进行乙肝疫苗接种,并且在其出生24小时内注射200IU HBIG。对婴儿于12±1月龄进行随访。采集婴儿的股静脉血,保存备检。2.运用化学发光免疫法(CLIA)分别检测母亲、新生儿及婴儿外周血血清的HBs Ag、anti-HBs、HBe Ag、anti-HBe、anti-HBc。3.运用荧光定量PCR分别检测母亲、新生儿及婴儿外周血HBV DNA。4.运用流式细胞技术(FCM)检测新生儿、婴儿外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、树突状细胞(DCs)、CD4+CD25+Treg相对比例。结果:1.HBs Ag阳性母亲服用替比夫定对HBV母婴传播阻断的疗效1.1两组新生儿情况的比较暴露组新生儿HBs Ag浓度、HBe Ag浓度均低于对照组新生儿,但差异均无统计学意义(t=1.416,P=0.161;t=-0237,P=0.813)。暴露组新生儿HBV DNA阳性率(0%)低于对照组(4.76%),但差异无统计学意义(c2=0.945,P=0.331)。暴露组新生儿HBV宫内传播率(17.39%)低于对照组(20.24%),但差异无统计学意义(c2=0.155,P=0.694)。1.2两组婴儿HBs Ag、HBe Ag、HBV DNA、乙肝疫苗无/弱应答的比较暴露组婴儿HBs Ag浓度、HBe Ag浓度、HBV DNA阳性率低于对照组婴儿,但差异均无统计学意义(P>0.05)。暴露组婴儿HBs Ag阴转率(36.22%)高于对照组(16.33%),但差异无统计学意义(c2=0.000,P=0.989)。暴露组婴儿HBe Ag阴转率(81.08%)、HBe Ag血清学转换率(75.68%)高于对照组,差异均有统计学意义(c2=7.286,P=0.007;c2=6.285,P=0.012)。HBs Ag阳性母亲服用替比夫定组乙肝疫苗无/弱应答率(5.41%)低于未服用组乙肝疫苗无/弱应答率(20.41%),差异有统计学意义(c2=3.952,P=0.047)。1.3不同HBe Ag状态孕妇使用替比夫定与婴儿HBe Ag阴转、HBe Ag血清学转换和乙肝疫苗无/弱应答的关系HBe Ag阳性母亲和HBe Ag阴性母亲暴露组婴儿HBe Ag阴转率、HBe Ag血清学转换率均高于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。HBe Ag阳性母亲暴露组婴儿乙肝疫苗无/弱应答率(3.23%)低于对照组婴儿乙肝疫苗无/弱应答率(24.24%),差异有统计学意义(c2=4.233,P=0.040)。非条件Logistic回归分析结果显示,服用替比夫定的母亲所生的婴儿发生乙肝疫苗应答的风险是未服用替比夫定母亲所生婴儿的0.320倍(OR=0.320,95%CI:0.012~0.890),服用替比夫定是婴儿乙肝疫苗无弱应答的保护因素。2.两组孕妇、新生儿及婴儿的不良结局比较暴露组孕妇的阴道出血率及腹痛率低于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。两组间新生儿畸形情况无统计学差异(P>0.05)。两组间婴儿的肺炎感染情况无统计学差异(P>0.05)。3.HBs Ag阳性母亲服用替比夫定对新生儿、婴儿外周血免疫细胞的影响3.1 HBs Ag阳性母亲服用替比夫定对新生儿、婴儿T淋巴细胞亚群的影响暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿外周血CD3+T细胞、CD8+T细胞比例低于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿,差异无统计学意义(t=1.556,P=0.124;Z=-0.419,P=0.675)。暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿外周血CD4+T细胞比例低于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿,差异有统计学意义(t=0.264,P<0.001)。暴露组的HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿外周血CD4+T/CD8+T细胞比值高于对照组的HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿,差异无统计学意义(Z=-1.867,P=0.062)。暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿外周血CD4+T细胞高于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿,差异有统计学意义(t=-2.117,P=0.038)。暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿外周血CD3+T细胞、CD4+T/CD8+T细胞比值高于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿,差异均无统计学意义(t=-2.020,P=0.071;Z=-1.876,P=0.061)。暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿外周血CD8+T细胞低于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿,差异无统计学意义(Z=-5.579,P=0.563)。暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿外周血CD4+T细胞显著高于新生儿期(t=2.999,P=0.036),且婴儿期CD4+T细胞与新生儿期CD4+T细胞差值有统计学意义(t=-2.044,P=0.048)。3.2 HBs Ag阳性母亲服用替比夫定对新生儿、婴儿B细胞的影响暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿外周血B细胞比例高于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿,差异无统计学意义(t=-0.055,P=0.956)。暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿外周血B淋巴细胞高于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿,差异无统计学意义(t=-0.151,P=0.880)。暴露组和对照组的B淋巴细胞比例婴儿期均高于新生儿期,但差异均无统计学意义(P>0.05)。3.3 HBs Ag阳性母亲服用替比夫定对新生儿、婴儿DCs细胞的影响暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿、婴儿外周血m DC、p DC细胞比例高于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿,差异均无统计学意义(P>0.05)。暴露组和对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿m DC、p DC比例均高于新生儿时期,但差异均无统计学意义(P>0.05)。3.4 HBs Ag阳性母亲服用替比夫定对新生儿、婴儿CD4+CD25+Treg的影响暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿外周血CD4+CD25+Treg细胞比例高于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿,差异无统计学意义(t=-1.132,P=0.257)。暴露组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿外周血CD4+CD25+Treg细胞比例低于对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿,差异无统计学意义(t=-0.655,P=0.512)。暴露组和对照组HBs Ag阳性母亲所分娩的新生儿CD4+CD25+Treg细胞比例高于婴儿时期,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.HBs Ag阳性母亲服用替比夫定组婴儿HBe Ag阴转率、HBe Ag血清学转换率均显著高于未服用组,提示替比夫定具有HBe Ag血清学转换率高的特点,抑制HBV DNA复制,进而阻断HBV母婴传播。2.HBs Ag阳性母亲服用替比夫定组婴儿乙肝疫苗无/弱应答率显著低于未服用组乙肝疫苗无/弱应答率。提示HBs Ag阳性孕妇孕晚期服用替比夫定联合新生儿接种乙肝疫苗和乙肝高效价免疫球蛋白可以显著降低乙肝疫苗无/弱应答率。3.HBe Ag阳性母亲暴露组婴儿乙肝疫苗无/弱应答率显著低于对照组婴儿乙肝疫苗无/弱应答率,提示HBe Ag阳性且高载量孕妇可以通过孕晚期服用替比夫定进而降低婴儿乙肝疫苗无/弱应答率。4.服用替比夫定的HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿外周血CD4+T细胞显著高于未服用替比夫定的HBs Ag阳性母亲所分娩的婴儿,且婴儿外周血CD4+T细胞高于新生儿期。提示HBs Ag孕期服用替比夫定联合乙肝疫苗和乙肝高效价免疫球蛋白可能通过提高外周血CD4+T细胞比例,进而降低婴儿乙肝疫苗无/弱应答率,阻断乙肝母婴传播。