激活蛋白诱导的水稻叶片SSH文库的构建

被引量 : 0次 | 上传用户:zwb19831101
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
植物激活蛋白是一类从多种植物病原真菌中分离得到的新型蛋白质,激活蛋白的核酸和氨基酸序列完全不同于已知的Harpin蛋白和Elicitin蛋白,与数据库中的已知蛋白均无同源性。它通过激活植物体内一系列相关基因,使植株表现出良好的抗病防虫、增强抗逆能力、促进植物生长等生物活性,且性能稳定、易分解、无残留;作为一种新型蛋白质农药,激活蛋白具有广阔的应用前景。为了进一步了解激活蛋白的作用机制,本研究构建了激活蛋白诱导的水稻叶片差异表达基因文库,并对部分基因进行了分析。 抑制性差减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)是一种分离差异表达基因的技术。该技术以差减杂交和抑制性PCR为基础,可快速有效地分离出差异表达基因,假阳性率低,效率较高,广泛用于生物及医学领域差异基因的克隆。 本研究采用从稻瘟菌(Magnaporthe griesea)中分离纯化出的激活蛋白,利用SSH技术,以激活蛋白处理的水稻作为处理组(tester),空白对照作为对照组(driver),构建水稻幼苗的正向差异表达cDNA文库。共获得1756个克隆,将其中267个阳性克隆送出测序,最终得到204条序列。 利用BLAST在GenBank数据库中对获得的cDNA序列进行相似性比对分析,除去重复序列后,共得到28个上升表达差异基因。这些基因所编码的蛋白质中有18个为功能已知或推测蛋白,这些基因涉及植物体内各种代谢反应,其中有4个基因参与了叶绿体的形成;3个参与了营养物质的转运代谢;其他的参与诸如细胞的周期调控、胞内细胞器运动、信号传导、基因调控、防卫反应等多种植物的生理生化功能。有10个基因在数据库中找到同源性序列,但功能尚不清楚;本研究为揭示激活蛋白的作用机理奠定基础。
其他文献
国际金融领域风险不断显现与发生 ,严重威胁着金融业的安全和发展 ,我国商业银行的经营风险也正在逐步由隐性转向显性。正视日益增长的风险 ,完善和加强内部风险管理与控制 ,
通过在大班额高职班级建设学习共同体的教学改革试验,探索破解当前普遍存在的大班教学的诸多难题。试验表明,在大班内以课堂学习共同体开展教学有利于差异资源作用的发挥、培
汽车前照灯是保障行车安全运行的重要部件,汽车前照灯的检定使用前照灯检测仪。根据我国汽车前照灯检测的现状,本论文设计了一种基于图像处理的汽车前照灯检测系统。 本论文
文章通过探讨全员育人的思想和实践路径,从"全员育人"的内涵、现状以及存在问题入手,探讨教育产业化、市场化状态下高校思想政治教育在人才培养中的意义。从文化论出发,在"全
数据库技术出现于20世纪60年代末,是计算机科学技术中发展最快的领域之一。数据库系统已在当代社会生活中获得了广泛的应用,渗透到了工农业生产、商业、行政管理、科学研究、教
利用遥感及地理信息系统软件,对青海省三角城种羊场草地类型及其景观动态变化进行了研究,涉及遥感影像分析、地理数据库建模、草地类型波谱分析、草地资源调查等,结果如下:1.
1工程概况扬州京华城表演教学楼位于江苏省扬州市中心东路以西,孙庄支路以北,属于长江北岸冲积平原地貌。建筑基地场地平坦,地下水类型为潜水,其历史 1 Project Overview Ya
在由社会主义计划经济向市场经济的转型期 ,必须加强对党员的全心全意为人民服务的宗旨教育。文章对现阶段党员教育的现状进行了理性分析 ,提出面对新形势和新任务 ,必须赋予
促进民营经济发展的关键在于从财政政策体系上指定有利于民营经济发展的政策 ,绝不能零打碎敲 ,在细枝末节上做文章。而做到这一点 ,重要的是实现思想观念上的根本转变 ,建立
目的研究抗肾小球基底膜(GBM)抗体的亲合力及其与临床病理表现的关系。方法以纯化的牛IV型胶原α链非胶原区1[α(IV)NC1]为靶抗原,采用抗原抑制性酶联免疫吸附法对我科近11年