α-MSH在重型颅脑损伤大鼠脑保护中的作用及机制研究

来源 :川北医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ASky2009
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目的:建立大鼠重型颅脑损伤(severe traumatic brain injury,STBI)模型,观察大鼠脑损伤区皮质白细胞介素-6β(Interleukin-6 beta,IL-6β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达及核转录因子-κB(NF-κB)、瞬时受体触发电位通道蛋白2(TRPM2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Casepase-9)的阳性细胞比例,脑组织含水量变化,并探讨α-促黑素细胞刺激素(α-MSH)对STBI后继发性脑损伤的脑保护作用及其机制。方法:选择清洁级成年SD雄性大鼠56只作为本次研究对象,通过改良Feeney’s法建立模型,按照随机数字表法将其分为4组,假手术组(Sham组)、颅脑损伤组(STBI组)、颅脑损伤后α-MSH治疗组(α-MSH组)、以及颅脑损伤后安慰剂组(0.9%Nacl组)各14只,每只SD雄性大鼠的体重范围在280克-300克,Sham组在水合氯醛麻醉后予以头皮切开后行钻孔处理,STBI组麻醉后行钻孔打击,α-MSH组应用1mg/kg分别经尾静脉注射α-MSH(1mg/ml),0.9%Nacl组行浓度为0.9%的氯化钠进行治疗。损伤后的6小时与12小时对其进行行为学评分,并在24小时进行断头处理,采取干湿称重法对损伤处脑组织含水量进行测定,并通过ELISA双抗体夹心法测定IL-6β,TNF-α的含量,并检测NF-κB、TRPM2及Casepase-9阳性细胞数的比例。结果:1.α-MSH组颅脑损伤后6小时、12小时的行为学评分与STBI组、0.9%Nacl组比较,P<0.05,差异有统计学意义,α-MSH组损伤后6小时、12小时的行为学评分更高;与Sham组相比较,P>0.05,差异无统计学意义。2.颅脑损伤后α-MSH组脑组织含水量与STBI组、0.9%Nacl组比较,P<0.05,差异有统计学意义,α-MSH组脑组织含水量更少;与Sham组相比较,P>0.05,差异无统计学意义。3.颅脑损伤后α-MSH组IL-6β、TNF-α的含量与STBI组、0.9%Nacl组比较,P<0.05,差异有统计学意义,α-MSH组IL-6β、TNF-α的含量更低;与Sham组相比较,P>0.05,差异无统计学意义。4.颅脑损伤后α-MSH组NF-κB阳性细胞数与STBI组、0.9%Nacl组比较,P<0.05,差异有统计学意义,α-MSH组NF-κB阳性细胞数的比例明显降低;与Sham组相比较,P>0.05,差异无统计学意义。5.颅脑损伤后α-MSH组TRPM2的阳性细胞表达与STBI组、0.9%Nacl组比较,P<0.05,差异有统计学意义,α-MSH组TRPM2的阳性细胞表达更低;与Sham组相比较,P>0.05,差异无统计学意义。6.颅脑损伤后α-MSH组Casepase-9的阳性细胞表达与STBI组、0.9%Nacl组比较,P<0.05,差异有统计学意义,α-MSH组Casepase-9的阳性细胞表达更低;与Sham组相比较,P>0.05,差异无统计学意义。结论:1.应用改良Feeney’s法成功建立模型的方法简便,具有较好的可重复性与可控性;2.STBI后损伤脑组织含水量增加,经α-MSH治疗后可以减轻大鼠损伤脑组织水肿;3.颅脑损伤后采取α-MSH治疗能够改善颅脑损伤实验动物的行为学评分,减少IL-6β、TNF-α的表达,降低NF-κB阳性细胞数比例,并减少TRPM2的阳性细胞表达及Casepase-9的阳性细胞表达。4.应用α-MSH治疗重型颅脑损伤效果明显,可有效保护损伤脑组织。
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