论文部分内容阅读
背景:腭裂是一种常见的先天性畸形,因其影响因素十分复杂,发生机制到目前仍未明确。对腭的发育来说,常常由于各种因素而影响腭的正常发育过程,导致腭部发育畸形。近年来一些研究表明,腭突中嵴上皮(MEE)细胞和腭胚间充质(EPM)细胞的增殖和凋亡对腭的正常发育具有重要作用,与腭裂的形成密切相关。在已知的能诱发腭裂的致畸物质中,维甲酸(retinoic acid, RA)是致畸作用比较显著的一种。如果在胚胎发育的初期给予过量的维甲酸,则会抑制神经嵴细胞的正常迁移,使腭突缺少足够的起源细胞而导致发育不足,形成腭裂。另有学者认为,过量的维甲酸抑制了腭突间充质细胞的增殖,并影响了中嵴上皮的转归而导致腭裂。5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法是近年来作为一种新的、简便、敏感、特异的检测方法,在瘤生物学、遗传学、分子生物学等领域得到广泛应用。其在颅面部发育研究中的应用也越来越广。BrdU能特异掺入S期细胞,是反映细胞增殖及跟踪监测移植细胞的理想指标。国内外尚无文献报道BrdU在腭突发育研究中的应用。本实验应用稳定的腭裂畸形的动物模型体系等,通过应用BrdU标记来研究维甲酸对腭突细胞增殖的表达变化,探索唇腭裂畸形的发病机制。目的:通过观察维甲酸诱导的腭裂小鼠腭突细胞的增殖发育,以探讨腭裂形成的机制。方法:选取10周龄左右SPF级C57BL/6J近交系小鼠,于第一天晚8时按雌雄比2:1合笼交配。第二天上午8时检测阴栓,将阴栓阳性的雌鼠记为妊娠0天(gestation 0 day,GD0),共得到孕鼠24只,将这些孕鼠随机分为两组:第一组为对照组,共8只;第二组为实验组,共16只。在妊娠第10天下午1时,实验组孕鼠按100mg/kg体重灌胃维甲酸,