五味子醇甲和乙素的超声波提取及其抑菌作用的研究

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五味子,俗称山花椒、秤砣子、药五味子、面藤、五梅子等,五味子为木兰科,不需重复种植的多年生落叶植物,本身植株又有观赏价值,五味子的五味是甘、酸、辛、苦、咸。而五味子又有南北之分,通常讲的五味子是北五味子。具有益气生津、补肾养心、收敛固涩的作用。五味子中重要的有效成分是木脂素,并含有挥发油、多糖和三萜酸等有效成分,其中木脂素类化合物具有保肝护肝、降酶、保护心血管等多种功能。现代药理研究表明,五味子中木脂素以五味子甲素、乙素、醇甲为主要成分,这些木脂素对肝炎患者具有明显的降低血清谷丙转氨酶水平、促进肝糖元生成、保护肝细胞的作用。我国北方地区拥有丰富的五味子资源,是提取五味子木脂素的原料,但是目前的研究结果是提取率低、纯化度低,严重影响了木脂素的使用前景。本研究为了更好的开发与利用五味子资源,以提高提取率为目的,以五味子木脂素中醇甲和乙素为研究对象,利用超声波细胞破碎机、大孔树脂、高效液相色谱分别进行提取、分离纯化、检测试验。在此基础上,利用五味子醇甲和乙素进行抑菌试验。结论如下:1、通过单因素试验与正交试验得到了最佳的提取条件,最佳的提取条件为:超声波功率为600W、固液比为1:40、超声时间为15min、溶剂浓度为75%。通过最佳的提取条件提取五味子醇甲与乙素,五味子醇甲的提取量为28.90mg/g,得为5.78%。五味子乙素的提取量为30.74mg/g,得率为6.15%。2、通过4种大孔树脂进行纯化五味子醇甲与乙素的优化树脂试验,得到纯化五味子醇甲与乙素的最优树脂均为AB-8。通过大孔树脂对五味子醇甲与乙素的静态吸附动力学试验,得到五味子醇甲与乙素均在4h后基本达到稳定平衡状态。通过大孔树脂对五味子醇甲的动态吸附动力学试验,得到了大孔树脂对五味子醇甲最佳动态吸附动力学试验条件,即:上样液浓度为0.07mg/mL、上样流速为1.5mL/min、洗脱流速为0.75mL/min、洗脱剂用量为80mL。通过大孔树脂对五味子乙素的动态吸附动力学试验,得到了大孔树脂对五味子乙素最佳动态吸附动力学试验条件,即:上样液浓度为0.05mg/mL、上样流速为1mL/min、洗脱流速为0.5mL/min、故确定洗脱剂用量为70mL。3、通过五味子醇甲和乙素对大肠杆菌、黑曲霉、啤酒酵母的抑菌试验,确定了五味子醇甲和乙素具有抑制大肠杆菌、黑曲霉、啤酒酵母效果。通过最低抑菌浓度的试验,确定了五味子醇甲对大肠杆菌的最低抑菌浓度在0.0625g/mL~0.125g/mL范围之间;对黑曲霉的最低抑菌浓度在0.125g/mL~0.25g/mL范围之间;对啤酒酵母的最低抑菌浓度在0.03125g/mL~0.0625g/mL范围之间。通过最低抑菌浓度的试验,确定了五味子乙素对大肠杆菌的最低抑菌浓度在0.0625g/mL~0.125g/mL范围之间;对黑曲霉的最低抑菌浓度在0.125g/mL~0.25g/mL范围之间;对啤酒酵母的最低抑菌浓度在0.03125g/mL~0.0625g/mL范围之间。
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