【摘 要】
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猪圆环病毒3型（Porcine circovirus 3,PCV3）作为一种新发现的病原体,自2016年美国首次报道后,已在全世界许多国家养殖的猪群内广泛流行,严重危害养猪业的发展。针对这一现状,快速、准确检测该病毒,对于预防和控制猪群该疾病的传播具有非常重要的意义。为了解新疆阿克苏地区规模化猪场猪群PCV3的感染情况,本研究采集2020-2021年间阿克苏地区4个规模化猪场（包括1个繁育场和3个
【基金项目】
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兵团科技特派员创新创业项目项目“阿拉尔市规模化猪场疫病防控预警系统的构建及推广示范”的部分研究成果（项目编号:2018CB037）课题主持人:李莲瑞教授（塔里木大学）
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猪圆环病毒3型（Porcine circovirus 3,PCV3）作为一种新发现的病原体,自2016年美国首次报道后,已在全世界许多国家养殖的猪群内广泛流行,严重危害养猪业的发展。针对这一现状,快速、准确检测该病毒,对于预防和控制猪群该疾病的传播具有非常重要的意义。为了解新疆阿克苏地区规模化猪场猪群PCV3的感染情况,本研究采集2020-2021年间阿克苏地区4个规模化猪场（包括1个繁育场和3个育肥场）共计584份全血样本,利用PCV3的Cap基因的特异性引物,对猪群猪圆环病毒3型的病原进行PCR检测。检测结果显示:新疆阿克苏地区4个规模化猪场共检测出44份PCV3阳性样本,总阳性率为7.53%（44/584）,其中繁育场PCV3感染阳性率3.25%（19/584）,育肥场感染阳性率4.28%（25/584）;通过对不同猪场类型和不同生长阶段猪群的检测数据分析,发现能繁母猪和仔猪易感PCV3,且PCV3的感染与生长阶段存在一定的相关性;通过对PCV3阳性样本的PCR产物进行测序分析,得到2种PCV3 Cap基因序列AKesucap-1（育肥场）和AKesucap-2（繁育场）,与国内外PCV3 Cap基因序列同源性比对分析,结果表明,AKesucap-1与CN/Xinjiang-AK16/2018株同源性为100%,AKesucap-2与NWHEB21、PCV3-CN-ZJ-QZ-2-2017同源性为99.6%。采用PCV3全基因组分段设计的特异性引物,以易感PCV3的繁育场的阳性样本DNA为模板,进行PCR扩增,经克隆、鉴定、测序后,拼接得到PCV3的全基因组序列,全长为2000bp,将其命名为PCV3-XJAKesu,该序列与8株国外PCV3参考毒株、6株国内PCV3参考毒株的全基因组序列的同源性分别为90.0%-99.4%和98.7%-99.1%。PCV3-XJAKesu与中国毒NWHEB21同源性最高,达到99.4%,两者同属于PCV3 3c亚群。针对PCV3 Cap基因保守区域设计一对PCV3特异性引物和荧光探针,构建了PCV3 Cap基因阳性质粒标准品,以标准品为模板,建立了PCV3的Taq Man荧光定量PCR检测方法。该检测方法的标准曲线在3.72×1010-3.72×10~3拷贝/μL之间呈现出良好的线性关系,其中相关系数为0.998,检测灵敏度为3.72×10~3拷贝/μL。通过组内和组间重复性试验,变异系数均小于1%,表明该方法具有良好的重复性。同时,该方法无交叉性扩增反应,比传统的PCR方法灵敏10倍。将本试验建立的q PCR方法检测53份猪全血样本,该q PCR方法比传统PCR技术阳性检出率高出3.7%。
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