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艾地普林是一类新型动物专用氨苄嘧啶类抗菌药,具有半衰期长、生物利用度高和表观分布容积大等特点,在多种动物体内的药动学数据表明其性质明显优于甲氧苄啶。该药可与磺胺类药物联用,从双重机制阻断细菌体内叶酸合成、抑制其生长繁殖,从而发挥优良的抗菌效果。但艾地普林的毒理学研究证明其具有一定的肝脏毒性,因此动物用药后在其体内的残留监控尤为重要。兽药残留检测对于可食性动物产品安全性的评价不可或缺,艾地普林和艾地普林/磺胺甲噁唑注射液在猪的残留消除、安全性还未做相关研究。为了该药物能更加安全有效的应用于临床,本研究开展了艾地普林和艾地普林/磺胺甲噁唑注射液在猪的残留消除试验,阐明艾地普林(ADP)、磺胺甲噁唑(SMZ)及乙酰磺胺甲噁唑(Ac SMZ)在猪可食性组织中的残留消除规律,确定其在猪的残留标识物、残留靶组织和休药期;同时还进行了艾地普林及艾地普林/磺胺甲噁唑注射液在猪的安全性试验,通过临床观察、生长性能、血液生理生化、脏器系数、病理组织变化等指标来评价该药在猪的安全性。研究内容和结果如下:1艾地普林、磺胺甲噁唑和乙酰磺胺甲噁唑超高效液相色谱串联质谱残留检测方法的建立本试验建立了艾地普林、磺胺甲噁唑和乙酰磺胺甲噁唑在肝脏、肾脏、肌肉和脂肪4种组织中的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。样品经2%氨化乙腈提取,0.1%甲酸水和乙腈(95:5,V/V)混合试剂复溶,UPLC-MS/MS检测。具体液相条件如下,色谱柱:BEH C18(2.1×50 mm,1.7μm)进样量:5μL;流速:0.2 m L/min;柱温30℃,以0.1%甲酸水和乙腈(0-3 min,5%乙腈;3-3.1min,5%-30%乙腈;3.1-5 min,30%-5%乙腈)为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子模式(ESI+)电离,多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量。该方法下艾地普林、磺胺甲噁唑和乙酰磺胺甲噁唑在20μg/kg-1000μg/kg浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。方法的检测限和定量限分别为10μg/kg和20μg/kg。在3个添加浓度下,艾地普林、磺胺甲噁唑和乙酰磺胺甲噁唑在肝脏、肾脏、肌肉和脂肪中的回收率均分别在83.7%-89.9%、84.3%-91.4%和82.8%-90.3%之间,日内变异系数分别在3.1%-6.0%、2.8%-6.8%和3.9%-6.2%之间,日间变异系数分别在4.8%-10.1%、4.2%-11.3%和5.1%-9.4%之间。该方法满足猪可食性组织中艾地普林、磺胺甲噁唑和乙酰磺胺甲噁唑的残留检测。2艾地普林单方和复方注射液在猪的残留消除研究健康三元杂交商品猪45头,随机分成9组(艾地普林单方注射液试验组4组,艾地普林复方注射液试验组4组,空白对照1组)。艾地普林单方和复方注射液给药剂量分别为10 mg/kg b.w.和25 mg/kg b.w.,每天2次,连续7 d。分别于停药后12 h、3 d、7 d、14 d和28 d宰杀动物,采集肝脏、肾脏、肌肉和脂肪,样品前处理,UPLC-MS/MS检测,结果如下:艾地普林注射液给药后,停药后12 h,在肾脏中浓度最高为29283.5μg/kg,脂肪中浓度最低为2525.7μg/kg;停药14 d后,肝脏和肾脏中ADP的浓度分别为90.4μg/kg和77.7μg/kg;停药28 d后,检测不到药物。ADP在肝脏中滞留时间最长,半衰期为3.01 d。确定艾地普林注射液在猪的残留靶器官为肝脏,残留标识物为艾地普林。采用WT1.4软件进行拟合,建议艾地普林注射液在猪的休药期为23 d。艾地普林/磺胺甲噁唑注射液给药后,停药后12 h,ADP、SMZ和AcSMZ在肾脏中浓度最高,分别为27725.9μg/kg、4440.0μg/kg和12806.2μg/kg;停药后7 d,肾脏中Ac SMZ的浓度为45.4μg/kg;停药后14 d,肝脏中ADP和SMZ的浓度为85.6μg/kg和19.6μg/kg,肾脏中ADP和SMZ的浓度分别为55.9μg/kg和50.7μg/kg,肌肉中SMZ的浓度为29.3μg/kg;停药后28 d,检测不到药物存在。确定艾地普林/磺胺甲噁唑注射液在猪的残留标识物和残留靶组织分别为艾地普林和肝脏。结果表明,艾地普林复方注射液在猪的残留靶组织为肝脏,残留标识物为艾地普林。采用WT1.4软件进行拟合,建议艾地普林/磺胺甲噁唑注射液在猪的休药期为20 d3艾地普林和复方注射液在猪的靶动物安全性根据《VICH兽药靶动物安全性研究指导原则》设计以下试验。将56头健康三元杂交商品猪分为艾地普林注射液1倍最高推荐剂量组(10 mg/kg b.w.)、3倍最高推荐剂量组(30 mg/kg b.w.)、5倍最高推荐剂量组(50 mg/kg b.w.),艾地普林复方注射液1倍最高推荐剂量组(20 mg/kg b.w.)、3倍最高推荐剂量组(60 mg/kg b.w.)、5倍最高推荐剂量组(100 mg/kg b.w.)和空白组(给予5倍剂量等体积的生理盐水),肌肉注射给药,每天2次,连续9 d。试验期间,观察受试猪的临床表现、体重增长情况、测定其血液生理生化、脏器系数等指标。试验结束时宰杀空白组和高剂量组试验动物,采集心脏、肝脏、肾脏等组织制作病理切片,进行病理学观察。结果表明,与空白组相比,艾地普林和艾地普林/磺胺甲噁唑注射液受试猪,临床表现正常,采食、饮水、排粪及排尿未见异常;生长率和饲料转化率没有显著性差异(P>0.05);艾地普林及艾地普林/磺胺甲噁唑注射液各剂量组在WBC、MCHC、MCV、TP和CK等生理生化指标与对照组相比含量发生一定的改变,但数值均在正常范围内波动,不会对猪生理生化造成显著性影响(P>0.05);各剂量组脏器系数与对照组相比差异不显著(P>0.05);各组织病理学观察均未见明显病理学影响,组织结构正常。说明艾地普林及艾地普林/磺胺甲噁唑注射液以5倍推荐剂量应用于临床时对猪是安全的。