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L—苹果酸是生物体代谢过程中的重要中间产物,无论是在有氧和无氧条件下,在线粒体产生能量物质ATP的代谢过程中起到重要作用。苹果酸作为人体代谢过程产生的重要有机酸,是三羧酸循环的中间代谢产物,易于吸收,可以迅速通过细胞膜进入线粒体内,直接参与线粒体能量代谢;同时又是苹果酸—天冬氨酸穿梭的组成部分,对胞液和线粒体之间还原当量的转移起着重要的作用。
节果酸可以缓解体力疲劳,能够增加机体的耐力;具有极强的抗氧化活性,能够捕获自由基,在医疗和食品等领域有良好的应用前景。目前,苹果酸在抗疲劳和抗氧化作用机理的研究缺乏报道,因此,对节果酸保健功能进行评价以及探讨其作用机理,能为苹果酸进入食品和保健品提供理论支撑。
本研究选择NIH种小鼠进行抗疲劳研究,对实验动物连续灌胃苹果酸30天后,测定小鼠的游泳时间及抗疲劳相关的生化指标,通过对苹果酸天冬氨酸穿梭代谢过程中关键酶的研究,从能量代谢的角度探讨了苹果酸抗疲劳的作用机理。其次,将实验动物SD大鼠随机分为4组,每组6只,连续灌胃苹果酸30天。通过测定大鼠体内抗氧化物质及脂质过氧化水平,对苹果酸抗氧化应激作用进行功能评价及机理探讨。最后,通过对线粒体呼吸链酶复合物进行研究,探讨了苹果酸提高线粒体功能的作用机理。
主要研究的结果如下:
1.0.210g/kg BW与0.630g/kg BW苹果酸组小鼠在游泳后20min内血乳酸浓度显著性降低,分别较空白对照组减少33%和26%,明显提高小鼠的乳酸清除速率和疲劳的缓解速率。节果酸显著增加苹果酸脱氢酶活性,推动三羧酸循环及苹果酸天冬氨酸穿梭速率。苹果酸组小鼠游泳后血清肌酸激酶分别较空白对照组降低31.7%,64.2%及68.7%,苹果酸显著降低了小鼠运动过程中血清肌酸激酶的水平,减少小鼠在游泳运动过程中骨骼肌的损伤,从而提高苹果酸小鼠运动至力竭的时间,0.210g/kg与0.630g/kg苹果酸组小鼠较空白对照组小鼠游泳时间分别增加26.1%及28.5%。
3.苹果酸可以有效降低老年大鼠ROS含量,提高老年大鼠肝脏SOD、CuZnSOD、GPx等抗氧化酶的活性及非酶抗氧化物质GSH的水平,在老年大鼠盯脏中GPx与SOD活性分别提高39.9%和34.4%,GSH水平提高68.1%,因此,苹果酸的补充可以增强机体的抗氧化能力,减少脂质过氧化的发生,起到抗氧化应激作用。
3.老年苹果酸组大鼠肝脏线粒体NADN脱氧酶、NADH—细胞色素C氧化还原酶及细胞色素C氧化酶活力分别较老年对照组提高24.82%,76.64%及63.26%。苹果酸能显著提高老年大鼠肝脏线粒体电子传递链复合物活性,对恢复老年机体内线粒体的功能有明显促进作用,能较好地提高线粒体抗氧化能力,是节果酸提高线粒体功能的重要原因。