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生物合成型苏氨酸脱氨酶(TD)是异亮氨酸(Ile)生物合成途径中的关键酶,受终端产物Ile的反馈抑制及竞争途径产物缬氨酸(Val)的激活。解除Ile对TD的反馈抑制对Ile生产至关重要,但是Ile和Val在TD的结合位点尚不清楚,而这对理性设计TD构建非Ile敏感性突变体是非常必要的。基于大肠杆菌磷酸甘油酸脱氢酶、拟南芥的天冬氨酸激酶1及大肠杆菌TD的ACT-domain结构比对结果,准确预测了Ile和Val在TD上可能的结合位点。根据氨基酸的保守性选择了其中的14个氨基酸进行定点突变,并对