【摘 要】
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细菌人工染色体(BAC)文库是复杂基因组生物的基因组研究中最方便、最可靠、应用最广的文库。本研究以已经构建的BAC文库为基础,复制了8倍基因组覆盖率的中国美利奴细毛羊的BA
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细菌人工染色体(BAC)文库是复杂基因组生物的基因组研究中最方便、最可靠、应用最广的文库。本研究以已经构建的BAC文库为基础,复制了8倍基因组覆盖率的中国美利奴细毛羊的BAC文库。文库的克隆总数约为19万,有序排列在497个384孔培养板中。对400个随机挑取的白色克隆进行的NotI酶切分析表明文库克隆的平均插入片段大小约为133 kb。理论上,从该文库中找到任意单拷贝序列的概率为99.93%。连续多次传代培养实验证实文库克隆的遗传稳定性好。脉冲场凝胶电泳检测了文库复制过程,结果表明没有污染。随后利用Pooling and Superpooling法构建了BAC文库混合池,随机挑取了混合池中的400个质粒进行了NotI酶切分析,结果表明该混合池中的BAC克隆平均插入片段大小约为133 kb,与BAC文库的平均插入片段相一致,达到了混合池构建的要求。该混合池可用于绵羊全基因组物理图谱的制作、基因组序列测定及诸多基因的克隆和功能研究等。
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