水稻OsPR10A蛋白质的表达特征及其在旱胁迫应答中的功能研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:qaz123_family
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病程相关(Pathogenesis-related,PR)蛋白质是一类受病原物诱导的蛋白质,在植物抵抗生物、非生物胁迫过程中发挥着重要作用。水稻(Oryza sativa L.)是世界上最重要的粮食作物之一,作为近一半人口的主粮,其高产、稳产对全球尤其是亚洲地区的粮食安全具有重大意义。水稻生长往往会受到冷、热、旱、盐和淹等恶劣环境的威胁,因此,了解水稻胁迫应答机理,培育耐逆的水稻品种具有重要意义。水稻基因组中有近千个PR基因,其中有关OsPR10A基因的功能研究有多篇报道,本实验室前期也鉴定到该蛋白质在水稻-白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)互作过程中发挥作用。目前对于OsPR10A在水稻非生物胁迫中的功能研究还尚待开展。本研究利用蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)技术,了解OsPR10A蛋白质在水稻生长不同时期、不同组织部位及多种非生物逆境胁迫下的表达特征。结果显示,在萌发期种子中,OsPR10A蛋白质在萌发前没有表达,随着萌发时间的延长,表达量不断升高;OsPR10A蛋白质在苗期根中不表达,分蘖期之后的根中表达;在叶片中,也是苗期不表达,分蘖期之后的叶片中表达;在水稻茎中,分蘖期、孕穗期和开花期OsPR10A均不表达;在叶枕部位,分蘖期和孕穗期有表达;在开花期的穗、花药、颖壳中的表达量较高,但穗轴中不表达;在幼嫩的旗叶中有较高丰度的表达,但随着旗叶的生长并进入衰老期,OsPR10A的表达丰度也逐渐降低。在非生物胁迫下,OsPR10A蛋白质受旱、盐胁迫的诱导,在旱胁迫处理下,表达量从2 d开始明显上升;在盐胁迫处理下,OsPR10A的丰度从12 h开始上升。在冷胁迫、热胁迫和淹胁迫中OsPR10A不表达。苗期离体叶片处理中,在不同激素诱导条件下,OsPR10A的表达量都有不同程度的升高;在光照处理中,OsPR10A的表达受恒光处理的诱导。另外,本研究构建了超表达OsPR10A转化载体,通过农杆菌转化的方法转化水稻TP309,用PCR和WB技术进行转基因植株检测,获得纯合阳性转基因植株,田间种植观察表明,转基因株系与野生型相比,株高变矮,穗长变短,结实率降低。用20%PEG6000在水稻种子萌发过程中进行旱胁迫处理,结果显示,OsPR10A超表达株系的根长和芽长均显著高于野生型,证明超表达OsPR10A蛋白质提高了水稻萌发期的耐旱性。
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