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目的:利用高胆固醇小鼠模型验证绞股蓝总皂苷降低血清总胆固醇和低密度脂蛋白的药效,并对其作用机制进行研究,考察FXR在其中的作用。方法:1.绞股蓝总皂苷药效学研究:C57BL/6雄性小鼠分为四个组,正常组(ND组)和高脂组(HFD组)分别给予38周的维持饲料和高脂饲料,另设两组(HFD16W和ND 16W)用于验证造模成功;绞股蓝皂苷组(HFD+GP)和辛伐他丁组(HFD+ST)持续给予38周的高脂饲料,并从16周开始到38周每日分别口服给予绞股蓝总皂苷(250 mg/kg,qd)和辛伐他汀(20 mg/kg,qd)。末次给药两小时后处死小鼠并收集血液、肝脏和十二指肠样本。肝脏组织HE染色;血清总胆固醇和低密度脂蛋白采用商业化试剂盒检测。2.绞股蓝总皂苷对高胆固醇小鼠肝脏基因调控的转录组学研究:利用BGISEQ-500RS RNA-Seq平台对ND组、HFD组和HFD+GP组血脂数据显著的小鼠进行深度测序,并利用软件进行深入分析。3.绞股蓝总皂苷对FXR介导的胆汁酸通路基因的调控:利用荧光定量PCR检测ND组、HFD组和HFD+GP组的FXR相关胆汁酸代谢基因的m RNA表达,并与转录组学数据进行比较,对转录组学数据进行验证。4.绞股蓝总皂苷对肝脏胆汁酸的调控:利用LC-MS/MS技术对ND组、HFD组和HFD+GP组小鼠肝脏14种胆汁酸进行轮廓分析。5.染色质免疫共沉淀分析绞股蓝总皂苷对核受体FXR的影响:采用FXR及IgG抗体分别对ND组、HFD组和HFD+GP组小鼠肝脏进行ChIP,荧光定量PCR分析三组小鼠肝脏在Sr-Bi第一个内含子区域,Ostβ和Bsep的启动子上游的结合水平。结果:1.绞股蓝总皂苷对脂质代谢的调控:给予高脂饲料后,小鼠体重、血清TC和LDL-C水平显著上升(P<0.05),肝脏组织病理切片显示脂肪蓄积,证明高胆固醇模型建立成功。灌胃给予绞股蓝总皂苷和阳性药辛伐他汀22周后,小鼠血清TC,LDL-C水平显著回调(P<0.05),肝脏组织病理切片显示脂肪蓄积减少,证明绞股蓝总皂苷具有调节脂质代谢的药效,尤其是在降低血清胆固醇方面药效明显。2.转录组学数据显示:绞股蓝总皂苷对全基因组,胆汁酸系统和药物代谢系统相关基因都有显著调控作用,对其中显著性基因进行分析,绞股蓝总皂苷上调Cyp7a1,Nr1h4(Fxr),Slco1a4,Cyp4a14和Cyp4a31的基因表达(P<0.05),但显著下调Nr0b2(Shp)和Slc25a4的表达(P<0.05)。3.RT-PCR结果显示:绞股蓝总皂苷在上调Cyp7a1,Cyp8b1,Fxr,Lrh1,Jnk2和Erk1/2基因表达的同时下调Shp的表达(P<0.05)。4.LC-MS结果显示:绞股蓝总皂苷显著降低肝脏TUDCA,GCDCA和GDCA含量,但显著升高CDCA,DCA和TDCA含量(P<0.05)。5.CHIP-qPCR数据显示:绞股蓝总皂苷作用后,FXR对Sr-Bi,Ostβ和Bsep相应区域的结合水平均显著升高(P<0.05)。结论:通过高胆固醇小鼠模型,验证了绞股蓝总皂苷降低血脂,调节脂质代谢的药理作用,发现绞股蓝总皂苷可以从基因和胆汁酸层面对胆汁酸代谢通路进行调控,其作用靶点可能是核受体FXR。