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目的:本实验为了探讨川芎赤芍合剂对缺血性脑卒中的治疗效果,根据脑缺血再灌注损伤产生的发病机制,选用GLAST、GLT-1及b FGF、IGF-1四个指标从两方面讨论川赤合剂对二次灌注产生的脑损伤的用药反应;探究其损伤区大鼠脑组织GLAST、GLT-1 m RNA相对表达量的变化及受损脑组织b FGF、IGF-1浓度的表达;探究常用活血化瘀药川芎赤芍是否可以作为合剂单独治疗的疗效;探究本配对药与临床常用中药银杏叶片、西药尼莫地平片疗效结果的对比;将川芎赤芍按照一对一的比例配伍分为高、中、低三种剂量,探讨其神经修复的作用,为中医临床应用提供理论依据。材料与方法:在选用动物时,根据脑梗死致病因素(如吸烟、饮酒等不良嗜好)等多方面的考虑,购买健康成熟的SD大鼠进行本次实验。选用健康的SPF级雄性SD大鼠210只,建立大脑缺血再灌注的实验模型,选取大脑中动脉为造模切入口,使用国际上常用的Longa线栓法,使大鼠大脑右侧缺血,线栓插入成功后缝合切口,待到缺血2h后拔出线栓1cm,这相当于缺血再灌注。等待大鼠完全苏醒不受麻药影响时,按照神经功能等级z-longa的评分法进行评分,评分在1、2、3分时验证造模成功。待模型成功复制后,将实验随机分为8组(每组18只):空白组、模型组、假手术组、川赤合剂高、中、低剂量治疗组、中阳药银杏叶组、西阳药尼莫地平组。各组于再灌注的第二天进行腹腔灌胃给药,空白组、模型组和假手术组给与体重等比例的蒸馏水,川芎赤芍合剂低、中、高剂量组及中阳、西阳药组亦给与体重等比例的药量,药物治疗疗程按时间分为3d、7d和14d。在大鼠第3天灌胃给药2h后,用3%的水合氯醛麻醉,每组各麻醉6只,麻醉后取右侧受损脑组织。7d和14d做法同上。两种方法检测指标,实时定量PCR检测GLAST、GLT-1 m RNA相对表达量的变化趋势,ELISA检测受损脑组织b FGF、IGF-1浓度的变化趋势。结果:1.各组受损脑组织中GLAST、GLT-1 m RNA相对表达量结果对比如下,与空白组、假手术组比较,模型组降低较为显著,其中存在的差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,与空白组对比,各治疗组的统计结果显示均有明显的升高,差异具有统计学上的意义(P<0.05);与模型组比较,各治疗组的统计结果亦有明显升高,差异具有代表性,有统计学意义(P<0.05)。2.溶解曲线在目的基因GLAST、GLT-l和内参基因GAPDH均只出现一个峰值,说明引物的特异性较好,可用于实时荧光定量PCR。3.受损脑组织匀浆取上清液后对bFGF、IGF-1分别进行各组浓度比较,结果显示如下,与空白组、假手术组对照比较,模型组升高较为明显,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,与空白组进行对照比,各用药组大鼠受损脑组织b FGF、IGF-1含量差别性增长,其中的变化具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠受损脑组织b FGF、IGF-1含量仍旧差别性增长,其中的变化仍具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.本实验将川芎赤芍按照1:1比例配伍成合剂,针对脑缺血再灌注损伤的大鼠,灌胃给药后,结果发现其与成方药银杏叶片、尼莫地平的功用一致,证明川赤合剂对脑缺血再灌注损伤有营养修复的作用。2.脑缺血后可诱导兴奋性氨基酸毒性增高,大鼠灌胃用药后使受损脑组织GLAST和GLT-1 m RNA相对表达量协同增强,抑制了细胞外增高的氨基酸毒性,可以证明川赤合剂可以诱导受损脑组织增强氨基酸转运体,其亦是缺血性脑损伤保护机制的关键环节。3.当脑组织发生缺血缺氧时,b FGF、IGF-1自身出现一个应激性保护作用,大鼠经灌胃给药后,发现川赤合剂可促进b FGF、IGF-1浓度表达的增强,也可证实川赤合剂具有保护神经缺损的功能。