论文部分内容阅读
目的：筛选乳腺癌白苔和黄苔患者与健康对照组之间的血清和唾液差异表达蛋白，以寻找乳腺癌早期诊断的生物标记物，并探索中医舌苔形成的机制和原理。
方法：临床收集乳腺癌患者具有典型的白厚苔和黄厚苔以及健康对照薄白苔、乳腺纤维瘤患者各10例，分别采集血清和唾液标本，提取蛋白，去除高峰度蛋白，进行蛋白变性、还原及酶解，然后进行iTRAQ标记和ESI-QTOF-QⅡ质谱鉴定，得到峰图用Data Analysis，MASCOTT2.2搜库和Scaffo1d软件分析，得到各组间血清和唾液差异表达蛋白。从筛选的差异蛋白中选择明显相关的蛋白，在乳腺癌和乳腺纤维瘤患者以及健康对照者各25例中用wes tern-blotting验证差异表达蛋白。
结果：
1.血清中共鉴定出335个蛋白，其中达到严格定量标准的蛋白数151个；
2.与健康对照组比较，乳腺癌（白苔组和黄苔组）与正常对照组间共筛选出变化倍数1.5倍以上的23个血清差异表达蛋白；
3.乳腺癌白苔组和黄苔组组之间筛选出变化倍数1.5倍以上的7个血清差异蛋白；
4.乳腺癌组与乳腺纤维瘤组之间筛选出变化倍数1.5倍以上的8个血清差异蛋白，这些蛋白均有可能作为区分乳腺肿块良性和恶性的标记物；
5.唾液中共鉴定出464个蛋白，其中达到严格定量标准的蛋白数125个；
6.本研究从两个乳腺癌组（白苔组和黄苔组）与正常对照组间共筛选到9个差异蛋白；
7.从乳腺癌黄苔组和白苔组唾液之间共筛选到差异达到1.5倍以上蛋白16个；
8.从乳腺癌组合乳腺纤维瘤组唾液间共筛选到5个差异达到1.5倍以上蛋白；
9.在乳腺癌和乳腺纤维瘤患者以及健康对照者各25例中验证Serotran-sferrin，Vitronectin，soform1 of Gel sol in和Zincfinger homeodomain四个血清差异表达蛋白，其结果与iTRAQ结果一致。
结论：本研究证实iTRAQ结合LC-MS/MS技术能够快速、有效地进行差异蛋白质组学研究，首次发现了多个与乳腺癌发病相关的血清和唾液蛋白，有可能作为乳腺癌早期诊断的生物标记以及区分乳腺癌良性与恶性的标记，同时发现血清和唾液蛋白与乳腺癌中医舌苔形成机制密切相关。