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随着化石能源日益减少及环境污染的不断加剧，生物能源越来越受到全世界的关注。微藻以高产油脂的特点成为生物能源领域的研究热点，而产油微藻诱变育种是微藻能源的重要研究内容之一。 本文以高产油脂的蛋白核小球藻生产藻株为出发藻株，对其使用60Co-γ进行二次诱变，并以本实验室成熟的微藻培养方法为基础，建立了一种有效的高产油蛋白核小球藻的高通量筛选方法，并成功应用于突变株的筛选，获得了2个高产油蛋白核小球藻突变株。此外，为了对藻种进行良好的性状保存，考察了藻种的超低温冷冻保种方法，以期为以后的微藻藻种保藏提供实验依据。 首先，建立了利用60Co-γ对蛋白核小球藻进行二次诱变育种的方法，初步获得了可能发生基因突变的5000个藻株。 其次，建立了高产油蛋白核小球藻高通量筛选方法:于96孔黑板中每孔加入原培养藻液100μL和97μL浓度为100％的DMSO，25min后加入3μL30mg/L的尼罗红染料，染色5min，酶标仪下37℃震板3min，激发波长为485nm、发射波长为535nm下检测荧光强度，出发藻株作为对比。 接着，利用所建立的高通量筛选方法对5000株蛋白核小球藻60Co-γ诱变突变株进行筛选，初步获得了4株高油脂含量的突变株。 最后对获得的4株突变株进行了“异养种子-光自养”和“自养种子-光自养”培养的初步放大验证，结果表明其油脂含量和产率均高于出发藻株。之后，对这4株突变株中产油能力最高的2个藻株（CP-232和CP-269）在3L和15L鼓泡式平板光生物反应器中进行了进一步放大验证，结果表明突变株CP-232和CP-269在3L鼓泡式平板光生物反应器中的油脂产率分别提高了25.8％和15.2％，在15L鼓泡式平板光生物反应器中的油脂产率分别提高了21.6％和16.2％。 此外，本文还研究了DMSO和甘油等冷冻保护剂对藻细胞超低温冷冻保种的影响，结果表明:冷冻保护剂浓度越高(DMSO在5％-10％浓度范围，甘油在14％-27％浓度范围)，细胞损伤越大。保种时间会影响藻种的存活率，在进行为期一年的保种时间里，保种时间越长，细胞损伤越严重。DMSO冷冻保种效果比甘油的好，并且浓度为5％的DMSO冷冻保种在5％、7％、10％的DMSO和14％、20％、27％的甘油六种超低温冷冻保种方法中效果最好，并且对细胞损伤也最小。