传统发酵乳制品中乳酸菌的抗生素抗性及相关性基因的研究

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本实验以分离自中国不同少数民族地区传统发酵乳制品中的93株乳酸菌(包括Lcasei、L.fermenturm、L.keirgranum、L.helveticus、L.plantrumm、L.delbrueckii、Lactococccus、Streptoccus、Enterococcus和Leuconostoc)为研究对象,进行12种常见抗生素的抗性分析,确定其对抗生素的最小抑制浓度(MIC),从而检测抗生素抗性菌株出现的频率;并在分子水平上检测了17种相关的抗性基因,观察抗性基因是否存在,从而确定相关抗性基因的出现与抗生素抗性之间的联系。结果如下。   菌株的抗生素抗性存在种间特异性,很少存在种内特异性,不存在地区特异性。   所有实验菌株对特定抗生素均存在先天抗药性。大多数菌株对新霉素、多粘菌素B、链霉素、卡那霉素、氯霉素和万古霉素存在抗性;对青霉素、红霉素和利福平敏感;   对四环素、庆大霉素和环丙沙星的抗性随着菌种的不同而存在差异。   通过PCR扩增,发现抗性基因存在种内特异性和种间特异性。在所有实验菌株中都未能检测到Pepla、tetO、tetK和tetL基因。一半以上的菌株中能检测到gyrA基因,rdxA基因与parC基因出现的频率随着菌种的不同而不同;frxA、cat、rpoB、errnB、rpp、meyA与terM基因出现在几个特定菌种内;bla、tetS与int基因出现的最少,只在少数几株菌内有检测。   对抗生素抗性基因与抗生素抗性的表现的相互关系进行分析,发现rpp、terM、tetS和int基因可能影响四环素抗性;rpoB基因可能与利福平抗性相关;cat基因对氯霉素的抗性起重要作用;mefA和ermB基因能影响到红霉素抗性;基因bla对β-内酰胺类抗生素抗性起一定作用;拥有parC和gyrA基因的菌株可以抗卡那霉素、链霉素和多粘菌素B;存在gyrA基因的菌株表现出了万古霉素抗性。   研究结果为LAB的抗生素抗性的进一步研究提供有用的数据。对乳酸菌抗生素抗性的研究,是对现有的和潜在的益生菌菌株体外安全性评估的一个重要内容。  
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