动物性产品中磺胺二甲嘧啶残留的IC-ELISA快速检测研究

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动物性食品兽药残留不仅给人民健康带来极大的危害,而且严重影响了中国的畜产品出口经济,损害了中国畜产品在国际上的地位和声誉.为此,加快对动物源食品中兽药残留的监测研究势在必行.而磺胺类药物作为一种常用的抗菌药一直被中国畜牧养殖业广泛使用,但其残留较高不利于人体健康和环境保护.中国允许最高残留标准为0.1mg/kg.该文目的在于研究开发一种适合大规模现场检测磺胺药物残留的快速筛选方法.为中国自行开发生产自有知识产权的磺胺类药物快速检测试剂盒提供技术参考.该试验采用间接竞争酶联免疫吸附试验为实验方法,以具有代表性的磺胺二甲嘧啶为检测对象,进行了快速免疫分析方法的探索和质量评估.具体内容有:免疫人工抗原的合成、高效价多克隆抗体的制备、试验基本条件的确定、畜产品的实际检测、方法评价、对照性试验.实验结论主要有:通过四种合成方法的结果比较,确认以丁二酸酐为间隔臂,通过琥珀酰化-水溶性碳化二亚胺法合成人工抗原是相对比较理想的抗原制备方法(结合比1:6).免疫兔试验制备出效价1280的抗血清并进行了纯化.设计了最适条件的IC-ELISA方法,绘制了校正曲线(r=0.997)并拟合曲线方程.方法检测限达到1.8ng/mL,回收率范围在77.13%~82.26%,批内变异系数范围为7.54%~14.54%,批间变异系数范围为6.30%~14.23%.实际检测中从五批次样品中检出一例阳性(87.32~119.19μg/kg).并和HPLC进行了比较试验,发现了IC-ELISA回收率高于HPLC,并证明两种方法相关系数大于0.94.
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