【摘 要】
：
我们通过建立大鼠脊髓全横断损伤模型,以改良的锚定消减杂交技术构建了该模型的差异表达cDNA文库,经点杂交排除假阳性和半定量PCR验证,从中筛选到一批差异表达EST序列。本文
论文部分内容阅读
我们通过建立大鼠脊髓全横断损伤模型,以改良的锚定消减杂交技术构建了该模型的差异表达cDNA文库,经点杂交排除假阳性和半定量PCR验证,从中筛选到一批差异表达EST序列。本文对其进行生物信息学分析,选功能线索明确的新基因进行基本特性研究,以期对认识脊髓损伤修复的分子机理有所帮助。分析表明,这些EST序列分属40个不同基因,其中20个是新基因。信息学分析显示它们参与了广泛的细胞生命过程,再次说明了脊髓损伤修复的系统复杂性。 本文成功克隆到其中新基因Scirrl的编码区序列,长144Obp,定位于1Oq12,该基因有5个外显子和4个内含子,编码蛋白SCIRRI具有“F-box+LRR”结构域,符合E3泛素连接酶中SCF家族底物结合亚单位的结构特征之一。实验表明SClRRI蛋白定位于细胞质。Scirrl基因在胚胎期特异表达于中枢神经系统且其时空表达顺序与中枢神经系统的发育进程一致,在成年动物中枢神经系统中则广泛分布,但尤以神经元功能活动频密的嗅脑、运动皮层、海马、梨状区、中央管周围灰质、脑桥灰质、巨细胞网状核、浦肯野细胞、红核、蓝斑和脊髓灰质第九板层运动神经元等部位为多,说明该基因对中枢神经系统的发育、对维持中枢神经系统尤其是活动频密的神经元的正常生理机能具有普遍意义;此外在检测的其它器官组织仅见于小肠绒毛表皮柱状细胞、胰脏A细胞和Ⅱ型肺间质细胞。制备了RNA杂交探针和特异性抗SCIRRI蛋白的兔抗血清,原位杂交和免疫组织化学结果均显示,大鼠脊髓全横断后,该基因mRNA和编码蛋白在大脑运动皮层以及脊髓灰质神经元中的表达明显增加,Western Blot结果也显示损伤后该基因编码蛋白在脊髓中的表达明显增加,说明该基因在脊髓损伤修复过程中可能发挥类似发育过程中的某种作用。
其他文献
目的观察两种丝裂原蛋白激酶（mitogen activated protein kinases，MAPK）抑制剂PD98059及U0126对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响，探讨其对弓形虫速殖子侵入宿主细胞信号转导途径的
第一部分大鼠同种异位心脏移植模型的建立目的建立一个稳定可靠、简便易行的同种异位心脏移植模型。方法取雄性Sprague-Dawley 大白鼠为受体,Wistar 大白鼠为供体,迅速摘取供
为了判断N2驱气窜特征,开展了N2在油、水相中溶解度和模型研究。考虑高温高矿化度,高钙镁离子的油藏情况,拓展了N2在地层水中溶解度计算模型的应用范围;首次提出了惰性气体在
目的:分析比较大隐静脉高位结扎剥脱(HL/S)及单纯经DSA泡沫硬化剂注射治疗(FS)两种VVs治疗方法的近期临床疗效及生活质量改善情况,以指导临床进行治疗方法选择。方法:回顾性比较两组各30例VVs患者,分别单独接受FS或HL/S治疗。评估包括首次治疗后的疗效、术后是否感染、并发症、手术时间和制动时间,随访期间记录患者VCSS评分,同时使用CIVIQ 20评分表评价患者生活质量,以比较两种治疗方
目的：1．研究VEGF质粒直接皮下注射，结合直流电脉冲刺激的基因治疗方案的基因表达情况及其血管生成效应 2．观察其对大鼠随意皮瓣成活的影响 3．对其安全性做初步评价。 方法：构建P
目的：探讨重建钢板治疗pilon骨折的手术疗效。方法：对35例pilon骨折的患者行切开复位重建钢板内固定手术治疗，并对其进行随访，观察临床疗效。结果：35例患者经3-31个月随访，其疗效按
扁桃体切除术是耳鼻咽喉头颈外科最基本最常用的手术之一,它主要包括剥离法和挤切法,此外尚有双极电凝切除和激光切除等方法。近年出现了低温等离子射频消融术切除扁桃体。近
胡锦涛总书记在党的十七大报告中提出：科学发展观的核心是以人为本，深入贯彻落实科学发展观，要求我们积极构建社会主义和谐社会。社会和谐是中国特色社会主义的本质属性。构建社
目的初步研究中国艰难梭菌临床分离株的基因分型、毒力和耐药相关基因分子特征。方法采用常规PCR分别检测艰难梭菌A、B毒素的基因tcdA和tcdB、二元毒素（Binary toxin）的cdtA、c