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目的1)构建肌切蛋白(Scinderin，SCIN)基因siRNA慢病毒载体，并转染骨肉瘤Saos2细胞。2)通过沉默SCIN基因在骨肉瘤Saos2细胞中的表达，观察其对骨肉瘤Saos2细胞相关功能的影响。方法1)构建SCIN-siRNA慢病毒载体并转染骨肉瘤Saos2细胞；2)采用Real time-PCR及Western blot两种方法检测转染后的Saos2细胞，分别在mRNA水平和蛋白水平检测SCIN的沉默效率；3)细胞增殖情况观察：CCK-8法分别检测siRNA-SCIN慢病毒载体的Saos2细胞（KD）、空白对照(NC)，以及转染含无义序列的慢病毒载体为阴性对照(CON)三组细胞增殖能力；4)细胞侵袭能力观察：细胞划痕实验及Transwell实验分别观察感染siRNA-SCIN慢病毒载体的Saos2细胞（KD）、空白对照(NC)，以及转染含无义序列的慢病毒载体为阴性对照(CON)三组细胞的转移及侵袭能力变化。结果1)经鉴定确认慢病毒载体构建成功后，分别转染入骨肉瘤Saos2细胞，质粒携带有GFP绿色荧光蛋白基因，荧光显微镜下，转染成功的细胞可见绿色荧光，镜下观察KD组及CON组，分别达到90%和85%以上带有绿色荧光，证明细胞转染成功。2)通过Real-time PCR和Western-blot两种实验方法验证沉默SCIN基因效率。结果显示，siRNA-SCIN（KD）组细胞中SCIN基因在mRNA水平和蛋白水平均较CON及NC组明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)。而CON与NC两组间差异无统计学意义(P>0.05)。3) CCK-8生长曲线观察发现沉默SCIN基因，Saos2细胞的增殖能力较对照组明显提高,与对照组自第2日起出现统计学差异(P<0.05)。4)细胞划痕实验提示siRNA-SCIN(KD)组在24h，48h向划痕中生长的距离和数量均较CON组及NC组细胞多，侵袭能力明显提高，差异有明显统计学差异（P<0．05及P<0．01)。5) Transwell侵袭试验结果显示siRNA-SCIN(KD)组较CON及NC组的侵袭率显著提高（P<0．05)。而CON与NC两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论1)本组实验成功的构建siRN-SCIN慢病毒载体，并成功转染骨肉瘤Saos2细胞，转染后的Saos2细胞SCIN基因的表达明显抑制。2) SCIN基因的沉默使骨肉瘤Saos2细胞的增值率及转移、侵袭率明显提高，提示在高发远处转移的骨肉瘤患者肿瘤细胞中可能存在SCIN基因的表达减少或缺乏。故SCIN基因过表达是否能成为预防骨肉瘤转移及复发的一种治疗手段值得进一步研究。目的比较儿童骨肉瘤与青年骨肉瘤临床特点差异，探讨影响预后的相关因素。方法1)回顾2003年10月至2012年3月间收治并确诊为骨肉瘤的166例19岁以下儿童及青年患者的病例资料，并对其预后进行随访，随访时间3～103个月，平均53.0个月，根据年龄将其分为儿童骨肉瘤(≤14岁)及青年骨肉瘤(14～19岁)两组，比较两组患者之间临床特点的差异;应用Kaplan—Meier法计算患者生存率。2)以性别、年龄、KPS评分、肿瘤生长部位、肿瘤体积大小、Enneking外科分期、病理性骨折、手术方式、新辅助化疗、术后辅助化疗次数、局部复发及远处转移12项因素为变量指标，应用Log—rank检验进行单因素分析，应用Cox回归模型进行多因素分析，研究这些因素与骨肉瘤患者生存率之间的关系。3)以卡方检验比较新辅助化疗与手术方式、新辅助化疗与肺内转移、新辅助化疗与局部复发、手术方式与局部复发之间的关系。同时观察积极治疗肺转移对预后的影响。结果1)166例骨肉瘤患者中位生存时间为31.0个月（95%可信区间22.0-40.0个月），累计1年，2年和3年生存率分别为90±2%、59±4%和45±4%。2)儿童骨肉瘤与青年骨肉瘤相比，前者更多接受截肢手术治疗（P=0.010）。两组在性别、Enneking外科分期、KPS评分、病理性骨折、肿瘤坏死率、病理分型、肿瘤部位、辅助化疗次数及肿瘤体积大小差异无统计学意义。3)单因素统计分析显示骨肉瘤有效预后因素有6个，分别为KPS评分、Enneking外科分期、是否接受新辅助化疗、术后辅助化疗次数（≥6次与<6次）、术后有无复发、是否伴有远处转移。4)多因素统计分析显示KPS评分、术后辅助化疗次数及是否伴有远处转移是影响预后的独立因素。5)卡方检验显示新辅助化疗与保肢率相关，而与肺转移，局部复发无关。手术方式与局部复发之间无相关性；然而积极处理肺部转移灶对生存有明显影响（P=0.000）。结论儿童骨肉瘤与青年骨肉瘤临床特点及预后相似，KPS评分、术后辅助化疗次数及是否伴有远处转移是影响儿童及青年骨肉瘤治疗预后的主要因素。