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人参茎叶含有和人参基本相同的人参皂苷类成分,但总皂苷含量高于人参。为了充分利用人参茎叶这一药用资源,在参考前人对人参茎叶中总皂苷提取、纯化研究结果的基础上,我们对人参茎叶中总皂苷提取、纯化工艺进行了优化研究。
本文以人参茎叶总皂苷含量为指标,采用正交试验,通过比较煎煮法、乙醇回流提取法两种方法,确定最佳提取工艺:以人参茎叶总皂苷含量为考察指标,对醇提水沉法、ZTC1+1天然澄清剂两种除杂方法进行对比研究,并对ZTC1+1天然澄清剂纯化人参茎叶总皂苷最佳工艺条件进行考察;以人参茎叶总皂苷含量为考察指标,筛选大孔吸附树脂类型,并考察所选大孔吸附树脂最佳工艺条件。
在煎煮法中,煎煮时间为主要因素,加水量为次要因素(为方便后期浓缩工作,可将加水量减为15倍),最佳工艺为:加水量为原药材质量的18倍,煎煮3次,每次90min,皂苷收率为5.93%;在乙醇回流法中,回流次数为主要影响因素,且具有明显的差异性,回流时间、乙醇浓度其次,影响最小的因素为溶剂用量,此时的最佳工艺条件为:乙醇浓度70%,溶剂用量为6倍,回流4次,每次60min,皂苷收率为14.98%。因此,70%乙醇回流法提取优于煎煮法。
对比研究醇提水沉法和ZTC1+1天然澄清剂法两种纯化方法,发现ZTC1+1天然澄清剂法所得人参茎叶总皂苷收率比醇提水沉法高约2%,因而确定ZTC1+1天然澄清剂法为较佳纯化方法。其最佳工艺为:顺次加入2B和4A,A组份低温冷藏24小时,所得皂苷收率为16.50%。
以人参茎叶总皂苷含量为考察指标,对ADS7、ADS8、ADS17、DA201、DM130、AB8六种大孔吸附树脂进行树脂型号筛选,结果以ADS7型大孔吸附树脂所得人参茎叶总皂苷含量最高,为90.7%,同时,树脂ADS7可使皂苷类化合物脱色,故在本课题中树脂ADS7为最佳树脂类型。
本实验首次在对人参茎叶中总皂苷提取、纯化工艺优化研究中使用了ZTC1+1天然澄清剂及ADS7型大孔吸附树脂,该项研究结果可为工业化人参茎叶总皂苷提取工艺提供参考。