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8W健康艾维茵肉鸡120羽随机分成空白对照组、药物对照组、感染对照组和药物治疗组,每组30羽。感染对照组和药物治疗组经右跗关节腔接种0.35mL(7.1×10~9CFU/mL)鸡源致病性金黄色葡萄球菌悬液复制鸡葡萄球菌性关节炎的病理模型,空白对照组和药物对照组同种途径接种0.35mL灭菌生理盐水,接种后3d药物治疗组和药物对照组开始用5mg/kg左旋氧氟沙星连续灌服4d,观察各组临床症状和病理变化,并于接种后0、1、4、7、14、21、28、35d,各组取8羽鸡由贵要静脉采血3mL,分离血清,-40℃保存,应用建立的鸡血清白细胞介素-6(chicken interleukin-6,chIL-6)活性MTF检测方法和ELISA方法研究血清中chIL-6活性与浓度的动态变化。 采用IL-6依赖细胞株建立鸡血清chIL-6活性MTT检测方法。结果显示:该方法采用B9细胞株,每孔培养细胞数为1.0×10~4个,培养时间为72h,OD值与细胞数显示有良好的线性关系;MTT的使用浓度为5mg/mL,最适剂量为每孔20μL,MTT最佳保留时间为4h;本方法最低检测限为0.1U/mL,具有较好的敏感性、稳定性和重复性。 人工接种葡萄球菌后,感染对照组鸡右跗关节在接种后7d明显肿大,左跗关节在接种后14d左右明显肿大,并出现鸡只死亡,试验结束共死亡7羽;治疗组鸡治疗一周后关节肿胀逐渐减轻,试验期间仅死亡1羽。接种后35d,剖检可见感染对照组鸡关节肿胀,内含干酪样渗出物,肌腱、关节软骨和韧带坏死;心肌出血,肝脏出血、坏死。治疗组剖检后除心、肝有散在的出血点外,其它脏器肉眼未见异常变化。空白对照组和药物对照组试验期间未见异常。 组织病理学检查表明,接种后35d,感染对照组鸡免疫组织器官的形态结构基本恢复正常,淋巴小结呈现增生性变化,胸腺、盲肠扁桃体出血,法氏囊水肿、出血,淋巴滤泡内有囊肿形成。治疗组鸡免疫组织器官仅见法氏囊浆膜下水肿,少数淋巴滤泡内有囊肿形成,淋巴小结的增生性变化更显著。 血清chIL-6活性检测结果表明:自接种后1d开始,感染对照组血清chIL-6活性一直呈上升趋势,并于接种后14d达到最高值23.25U/mL,随后逐渐降低,其血清IL-6活性与空白对照组比较,接种后1、4、28、35d差异显著(p<0.05),7、14、21d差异极显著(p<0.01)。左旋氧氟沙星治疗组治疗后1d血清chIL-6活性降至最低值3.90U/mL,随后呈上升趋势,但与空白对照组和药物对照组比较均无差异显著性,与感染对照组比较,治疗后1、4d差异显著(p<0.05),治疗后11、18d差异极显著(p<0.01)。试验期间药物对照组与空白对照组血清chIL-6活性无差异显著性(p>0.05)。 血清chIL-6浓度检测结果表明:接种后感染对照组血清chIL-6浓度显著高于空白对照组,在接种后1、35d差异显著(p<0.05),4、7、14、21、28d差异极显著