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目的:观察陇中损伤散提取物含药血清对体外培养大鼠成骨细胞增殖和分化的影响,为陇中损伤散工艺的改进提供药效学参考。
方法:用不同浓度陇中损伤散提取物含药血清培养成骨细胞,用倒置相差显微镜、组织化学染色等手段进行形态学和组织学观察,MTT法测量细胞增殖,并以碱性磷酸酶活性,矿化结节数,I型胶原免疫组化等指标与陇中损伤散原药组和空白对照组进行对比研究。
结果:①通过对成骨细胞持续培养,这些细胞首先开始增殖,然后分化和分泌,最终在体外形成矿化基质,并能大量分泌I型胶原,组织学鉴定显示碱性磷酸酶染色和I型胶原免疫组化呈阳性;②MTT的结果分析,5%、lO%浓度的含药血清均对体外培养成骨细胞增殖、分化有促进作用,15%浓度的含药血清对成骨细胞增殖、分化产生了抑制;③lO%含药血清浓度为成骨细胞最佳生长浓度。④陇中损伤散提取组和原药组在碱性磷酸酶染色阳性细胞数、矿化结节数、I型胶原表达能力方面与空白对照组比较有明显差异,但二者之间无明显差异。
结论:陇中损伤散提取物能促进成骨细胞的增殖和分化,这种作用可能是其促进骨折愈合的一种细胞学机制之一。此外,损伤散提取物与原药药效相当,剂量更少,为陇中损伤散工艺的改进提供了参考。