论文部分内容阅读
现代医学研究表明，高脂血症是动脉粥样硬化的主要危险因素之一，易导致一系列的心脑血管疾病，严重危及人体健康。因此，降低血脂水平，抑制高脂血症的形成对防治心脑血管疾病具有十分重大的现实意义。本研究以云芝为实验材料，通过液体深层发酵，分别从菌丝体和发酵液提取云芝胞内多糖(IPCV)和胞外多糖(EPCV)。以雄性昆明小鼠为研究对象，通过高脂饲料建立高脂血症模型，探究IPCV和EPCV的降血脂功效及相关的作用机制。其研究结果，为云芝多糖降血脂作用的研究奠定了理论基础，并为开发云芝多糖降血脂功能食品或药品提供了实验依据。具体研究方法和结果如下。
1.云芝经500L发酵罐液体深层发酵后，菌丝体产量为1.5g/L。通过正交试验研究热水浸提法的料液比、提取温度、提取时间和提取次数四因素对IPCV提取率的影响，获得了最佳提取条件:料液比为1∶30，提取时间为2h，提取温度为90℃，提取次数为2次。
2.云芝菌丝体和发酵液经离心、超滤、脱脂、浓缩、去蛋白、醇沉、脱色素、透析等一系列提取纯化工艺后，最后经真空冷冻干燥分别得到IPCV和EPCV。IPCV提取率为5.38％，EPCV提取率为0.024g/L。
3.检测IPCV和EPCV中总糖，还原糖和蛋白质的含量。IPCV中该三种物质含量分别为66.58％，3.14％，0.36％;EPCV中为63.91％，3.08％，0.17％。
4.采用预防模式，通过高脂饲料建立小鼠高脂血症模型，分别对小鼠灌胃50mg/(kg·d)，100 mg/(kg·d)及200 mg/(kg·d)低中高剂量的多糖提取物溶液，持续28d后观察其对小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平的影响，以评价多糖的降血脂功效。检测云芝多糖提取物对小鼠血清中脂蛋白脂肪酶(LPL)，肝脏中3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)和胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)活性的影响以探究多糖发挥降血脂作用的相关机制。
(1).结果显示，IPCV及EPCV均可有效降低高脂血症小鼠血清中TC，TG和LDL-C的水平(P＜0.01)。在最佳作用剂量下，50mg/(kg·d)的IPCV和200mg/(kg·d)的EPCV分别使得TC，TG，LDL-C下降19.12％，50.41％，26.32％和20.97％，57.85％，27.72％。这表明云芝胞内多糖和胞外多糖提取物均有良好的降血脂作用。IPCV和EPCV均可显著降低动脉粥样硬化指数，具有抗动脉粥样硬化的能力。EPCV能显著抑制小鼠体重的增加，但IPCV却无此作用。同时，IPCV和EPCV均可有效降低高脂血症小鼠的肝指数，保护肝脏。综合比较，对于云芝多糖提取物，EPCV降血脂效果略优于IPCV。
(2).EPCV降低了HMGR活性(P＜0.05)，从而抑制内源性胆固醇的合成，但IPCV未对HMGR产生显著影响。IPCV和EPCV均可使血清LPL活性增强(P＜0.01)，促进血清TG的分解。但IPCV与EPCV均未显著增强CYP7A1活性，故未能有效促使肝脏中升高的胆固醇转化为胆汁酸。这表明IPCV和EPCV发挥降血脂作用，极可能与它们对血脂代谢酶HMGR和LPL的影响密切相关;同时IPCV和EPCV降血脂机制存在差异。