论文部分内容阅读
目的：体外模拟热CO2气腹环境,通过细胞实验,初步探讨热CO2对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡及侵袭迁移能力的影响,由此可为腹腔镜胃癌手术时应用热CO2气腹的可行性和安全性奠定一定的理论基础。方法：建立热CO2气腹体外实验模型,由CO2钢瓶、CO2加热器及气腹箱组成；胃癌细胞SGC-7901分组处理：对照组(细胞培养箱中培养),单纯热疗组(42℃环境中培养3h),单纯CO2组(注入常温CO2,培养细胞3h)；热CO2组(注入42℃CO2,培养细胞3h)。CCK-8法检测各组细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI流式细胞术及Hoechst33342/PI双染荧光显微技术检测细胞凋亡情况,透射电镜观察各组细胞形态学改变,细胞划痕实验及transwell小室迁移实验检测细胞侵袭迁移能力的改变。实验数据由均数±标准差(x±s)表示,通过SPSS17.0软件分析,p<0.05差异有统计学意义。结果：CCK-8法检测细胞增殖情况,结果显示：对照组增殖抑制率为0,单纯CO2组细胞增殖抑制率为11.76±7.29%,单纯热疗组细胞增殖抑制率为28.08±6.77%,热CO2组细胞增殖抑制率为38.93±7.63%,通过统计分析,差异有统计学意义,热CO2气腹能够显著抑制胃癌细胞增殖(p<0.05)；Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测结果显示：对照组,单纯CO2组,单纯热疗组,热CO2组细胞凋亡率分别为0.033±0.015%,2.64±0.21%,3.50±0.22%,4.91±0.20%,差异有统计学意义,热CO2显著诱导胃癌细胞凋亡(p<0.05)；Hoechst33342/PI双染荧光显微镜技术检测结果显示：与其余3组细胞相比,热CO2组细胞出现更多被染成亮蓝色或亮红色的凋亡坏死细胞,由此说明,热CO2组细胞发生了显著凋亡；通过透射电镜进行细胞形态学检测结果显示：热CO2组细胞的细胞质浓缩,染色质固缩、边集,核碎裂,凋亡小体形成,其细胞膜及细胞核发生凋亡形态学变化；细胞划痕实验及transwell小室迁移实验检测结果显示：与对照组相比,热CO2组胃癌细胞的侵移距离明显缩小,且通过微孔滤膜的细胞数量明显减少(通过滤膜的细胞数越多,细胞迁移能力越强),由此说明,热CO2组细胞的侵袭迁移能力显著降低。结论：热CO2气腹能够诱导胃癌细胞凋亡,并抑制其增殖及侵袭迁移能力。本研究结果为进一步的相关机制研究及深入的动物实验研究提供了一定的可行性,并为热CO2气腹的临床应用奠定了一定的理论基础。