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紫外线辐射（UVR）可造成皮肤组织的光损伤,引起皮肤红斑、水肿、色素沉着、毛细血管扩张、皮肤粗糙和出现皱纹,UVR也是导致皮肤老化的最重要环境因素。UVR诱导的氧化应激在光损伤发生中起重要作用。丹参是一种常用中药,具有抗氧化、抗炎、改善微循环和抗凝血等广泛药理作用。虽然具体的机制尚不清楚,丹参的抗氧化作用已被证明是其发挥药理效应的重要机制之一。因此,对丹参主要有效成分的抗氧化作用进行研究,筛选出药理活性较强的成分,探究其抗光损伤的作用机制,对于丹参在皮肤保护方面的进一步应用具有重要意义。本课题通过对丹参素（DSS）、丹酚酸B（Sal B）、丹参酮2A（Tan-2A）和隐丹参酮（CTS）的抗氧化活性的比较,筛选出抗氧化作用最强的成分,并对其改善线粒体功能障碍、抗光老化以及可能的作用机制进行深入研究。本课题一共分为3个部分:1.丹参主要有效成分的抗氧化活性筛选:分别用UVA和UVB辐照HFF-1细胞和Ha Ca T细胞造成氧化应激的细胞模型,用不同浓度的DSS、Sal B、Tan-2A、CTS处理,流式细胞仪检测细胞内ROS水平,发现四者均具有抗氧化活性;进一步比较同一浓度的DSS、Sal B、Tan-2A、CTS抗氧化活性,发现CTS的活性最强。因此,后续主要针对CTS对UVR诱导的细胞损伤的保护作用及其作用机制进行进一步研究。2.CTS对UVA诱导的HFF-1细胞氧化损伤的保护作用:用UVA诱导的HFF-1细胞氧化损伤模型进行研究,结果表明,CTS预处理能够有效降低UVA辐照的HFF-1细胞中ROS水平,进而减少线粒体损伤。表现在与UVA组相比,能够使下降的线粒体膜电位升高、ATP的产生量增加、线粒体数目增多,从而改善了UVA引起的线粒体功能障碍;CTS还能够有效抑制UVA辐照引起的HFF-1细胞死亡和凋亡,抑制UVA辐照引起的细胞老化。Western blot结果发现CTS对UVA辐照的HFF-1细胞内控制线粒体生物合成的AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路和Nrf2抗氧化通路均有激活作用。3.CTS对UVB诱导的Ha Ca T细胞的保护作用:用UVB辐照Ha Ca T细胞的氧化应激模型进行研究,发现CTS在预处理时间为0.5 h-12h时,能够有效降低细胞内的ROS水平,且具有时效关系;细胞免疫荧光实验结果表明CTS能够减少UVB导致的DNA损伤,而且CTS能够抑制UVB辐照所致的线粒体膜电位下降,提高细胞的ATP产生量,并且增加UVB辐照的Ha Ca T细胞内线粒体数目;CTS还减少了UVB辐照造成的Ha Ca T细胞死亡和凋亡;抑制UVB导致的Ha Ca T细胞老化;Western blot结果表明CTS能够激活UVB辐照的Ha Ca T细胞内AMPK/SIRT1/PGC-1α和Nrf2信号通路。综上,本研究通过对丹参主要有效成分抗氧化药理活性的筛选,发现在DSS、Sal B、Tan-2A、CTS这四种有效成分中,CTS的抗氧化药理活性最强。进而在UVA和UVB诱导的皮肤细胞氧化应激模型上发现,CTS通过激活Nrf2抗氧化信号通路来抑制UVR所致的细胞内ROS水平升高,从而抑制其导致的氧化损伤;并且通过激活细胞内控制线粒体生物合成的AMPK/SIRT1/PGC-1α通路,促进紫外线辐射的皮肤细胞内线粒体的生物合成,从而对UVR所致的线粒体功能障碍起到保护作用,进一步延缓了UVR引起的皮肤细胞死亡、凋亡以及细胞老化。这些研究发现进一步丰富了对丹参有效成分CTS抗紫外线损伤作用及其作用机制的了解,为其在防晒和抗皮肤光损伤方面的应用奠定了实验基础。