火焰卫矛组织培养再生体系优化及遗传转化研究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:rainbow123456789
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
火焰卫矛(Euonymusalatus‘compacta’)属于卫矛科落叶灌木,因其叶片呈火焰红色而具有重要的园艺观赏和经济价值,每株成熟的火焰卫矛每年能生产成百上千粒种子。由于通过鸟类和流水的传播,火焰卫矛在美国非常流行,甚至不可控制,破坏其他植物区系,严重威胁生态平衡。本研究以火焰卫矛为研究对象,优化了植株组织培养再生体系,并在此基础上探索农杆菌介导火焰卫矛遗传转化技术,为利用基因工程技术对火焰卫矛进行遗传改良打下了基础。主要研究结果如下:  (1)火焰卫矛植株组培再生体系优化  本研究以火焰卫矛成熟胚培养长出的子叶、下胚轴为外植体进行组织培养及植株再生研究,优化了火焰卫矛组织培养再生体系。研究结果表明:成熟胚培养基为WPM+TDZ0.5mg?L-1;愈伤组织诱导培养基为WPM+6-BA6mg?L-1+IBA0.2mg?L-1;不定芽分化培养基为WPM+6-BA6mg?L-1+IBA0.2mg?L-1;不定芽增殖和壮苗培养基为WPM+6-BA4mg?L-1;生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg?L-1+AC0.5g?L-1。移栽基质为营养土,成活率为83.3%。  (2)农杆菌介导火焰卫矛遗传转化体系建立  以火焰卫矛子叶和下胚轴为转化受体进行遗传转化体系研究,确定了子叶和下胚轴不定芽分化的有效卡那霉素(kan)筛选压分别为60mg?L-1和50mg?L-1;而在抑菌剂头孢霉素(Cef)和特美汀(Timentin)浓度对比研究中发现,Timentin对不定芽分化的影响要小于头孢霉素(Cef)的影响,Timentin浓度为400mg?L-1时,子叶分化率达到23.89%,而Cef在相同浓度下子叶分化率仅为15.56%;并确定Timentin最佳抑菌浓度为200mg?L-1。探讨了遗传转化过程中外植体预培养时间、共培养时间、浸染菌液浓度和浸染时间对遗传转化效率的影响。结果表明,外植体预培养2d,共培养3d,菌液浓度OD600为0.4~0.5,浸染6min为最佳技术参数;在YEP液体培养基中添加100μmol·L-1AS可提高转化率8.8%。  (3)转基因植株筛选鉴定  通过农杆菌介导法遗传转化火焰卫矛,并对转化植株进行GUS组织活性及PCR检测,证明由Barnase和iaaM组成的超级不育表达元件已经整合到火焰卫矛植株,从78株抗性植株中筛选出转基因植株3株。
其他文献
先天性巨痣(Giant Congenital Melanocytic Nevus,GCMN)常定义为成年后直径大于20cm的先天性色素痣.其发病机理目前多认为是黑素母细胞于妊娠5~25周内,由神经嵴向皮肤及软脑膜
为实现对受到小麦条锈病菌侵染而尚未表现明显症状的小麦叶片进行早期检测,利用近红外光谱技术结合定性偏最小二乘法建立了小麦条锈病潜育期叶片定性识别模型。获取健康叶片3
切开重睑术存在术后瘀青、水肿、恢复时间较长等术后并发症,围术期对术区的处理是术后恢复的关键步骤.近年来,对于切开重睑术术区的处理方法不一.为寻找有效、简便的方法或药
目的:研究1,25-(OH)2D3对连续多次小剂量链脲菌素诱导的自身免疫性糖尿病小鼠的免疫干预及其机制。方法:1、造模:连续5天腹腔注射STZ(40 mg·kg-1),以血糖水平持续高于16.7 mmol/
针对洼东煤矿井田的软岩地质特征与煤层结构,论述了SGW-40T刮板输送机合理铺设长度的必要性和重要性,并提出了具体铺设长度 According to the soft rock geological characteristics
中药材厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils)为木兰科植物厚朴、凹叶厚朴或滇缅厚朴的干燥干皮、根皮和枝皮。其主要有效成分为厚朴酚(Magnolol)与和厚朴酚(Honokiol)。本文应用高效液相色谱法对都江堰厚朴进行研究,其中详细探讨了它的色谱条件,重点在于流动相比例的选择,得到当色谱条件为:流动相为乙腈(B2)-1%冰醋酸(A2)溶液;流速为1mL/min;色
新疆有着极其丰富的大理石、花岗石石材资源,资源点星罗棋布于天山南北。地质普查资料表明,全疆约有一半以上的县、市有石材资源。截至1996年底,区内已发现具有工业价值的大
期刊
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
炭疽菌属(Colletotrichum Corda)真菌是一类全球性分布的植物病原菌,特别是在高温多湿的热带和亚热带,可引起果树、农作物等多种植物的炭疽病发生,造成很大的经济损失。其中,