环多肽ZS-6与癌细胞特异性结合的免疫学和HPLC检测证据

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研究背景:多肽环多肽ZS-6(YPHYSLP*****)[1.2.3,4,5]是实验室利用噬菌库肽技术技术得来的一条亲水性多肽,本实验关于环多肽ZS-6对肺癌细胞及组织的特异性作进一步的研究。目的意义:特异性的研究对环多肽ZS-6是否具有作为新药开发的价值具有决定性的意义,而该新药对肺癌的靶向治疗提供了载体,连接上顺铂、紫杉醇等治癌药物则可大大减轻药物的毒副作用,更加有效达到抑癌效果。方法:本实验利通过化学方法合成多肽环多肽ZS-6并部分标记绿色荧光素异硫氰酸(FITC)。利用细胞免疫荧光、组织免疫荧光鉴定多肽环多肽ZS-6-FITC与肺癌细胞、人肺癌组织结合的特异性和亲和力。并通过多肽环多肽ZS-6FITC在荷瘤裸鼠体内的分布实验观察环多肽ZS-6在荷人肺癌裸鼠体内的分布情况。结果显示:(1)细胞免疫荧光试验证明环多肽ZS-6-FITC代对肺鳞癌细胞NCI—H1299亲和力高,对肺腺癌细胞A549同样具有较高亲和力,对肝癌细胞HPG-2和结肠癌HT-29的亲和力较弱,而与肝正常细胞L0-2和肺正常细胞WI-38结合能力不强;(2)组织免疫荧光试验证明,环多肽ZS-6-FITC对肺鳞癌组织亲和力很强,对肺腺癌组织有较高亲和力,而对肺正常组织亲和力很弱;(3)多肽环多肽ZS-6-FITC荷瘤裸鼠体内分布试验证明环多肽ZS-6-FITC在裸鼠肿瘤组织有特异性聚集,而在其它正常组织(心、脑、肺、肾、)分布较少,但在主要的代谢器官肝脏同样有较强的分布。(4)多肽经过裸鼠体内与脏器的结合亲和力肿瘤组织最高,其余组织相对较低或者不结合。结论:实验证明了环多肽Z—S6与肺癌细胞、人肺癌组织结合有很强的亲和力,从HPCL检测的结果同样证实了在裸鼠体内各脏器与多肽结合的亲和力。以上实验结果进一步提示,环多肽ZS-6FITC有较显著的肺癌亲和力、特异性及体内靶向性,具有用于开发肺癌诊断、治疗药物的潜力,并为以其为“钓饵”发现新的肺癌标志物打下了基础。
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