【摘 要】
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油菜素甾醇是一类在植物的发育过程中起重要作用的固醇类激素。为了更全面的了解油菜素甾醇的信号转导，我们以sud1为材料进行EMS诱变筛选，得到一个新的突变体bin2-sf,它完全抑
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油菜素甾醇是一类在植物的发育过程中起重要作用的固醇类激素。为了更全面的了解油菜素甾醇的信号转导，我们以sud1为材料进行EMS诱变筛选，得到一个新的突变体bin2-sf,它完全抑制了sud1的表型特征，表现出卷曲的叶片，缩短的叶柄。bin2-sf的BIN2基因第308位的丝氨酸突变为苯丙氨酸。由于bin2-1不育使之不能成为很好的遗传材料，而我们得到的bin2-sf不仅具有BIN2功能获得型突变体的表型，而且能够结足够多的种子。以bin2-sf为材料筛选抑制子，我们得到一个与BRI1的过表达表型相似的突变体-robin1(revertant of bin2-sf1)。robin1可以部分恢复油菜素甾醇合成突变体和信号中断突变体的表型。ROBIN1过表达能够增强bri1-5生长缺陷的表型，在野生型中的过表达能够产生极端矮化的转基因植物。ROBIN1编码一个HECT类型的E3连接酶。免疫印迹实验证明robin1中BRI1的蛋白含量明显增加。过表达BRI1能够产生与robin1类似的表型。一系列的分子，生化实验表明BRI1的积累不是由于蛋白质降解变慢引起而是由于蛋白质合成的增加，并且我们还发现robin1中BRI1的转录水平也没有明显的改变，说明蛋白质合成的增加并不是转录水平引起的。生理，生化和分子生物学实验证明ROBIN1是参与油菜素甾醇信号通路的负调控因子，它通过抑制BRI1的蛋白合成而阻止油菜素甾醇的信号转导。
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