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研究目的建立测定人血浆中EFV浓度的HPLC方法,考察HBV/HCV共感染对HIV/AIDS患者接受EFV 600mg治疗后的血药浓度、临床疗效及主要肝功能生化指标的影响,以明确EFV血药浓度、肝毒性与共感染三者间的相关关系。研究中国HIV/AIDS初治患者服用EFV 400mg达到稳态后的药动学特征,考察EFV血浆药物浓度、临床疗效指标及CNS相关不良反应,分析EFV浓度与病毒学抑制及不良反应的关系,以探讨EFV 400mg给药方案在中国HIV/AIDS患者的安全性及有效性。研究方法以地西泮为内标,取血浆样本500μL,使用甲基叔丁基醚(MTBE)液液萃取,N2挥干后,用100μL流动相复溶,取20-80μL上清液进样。色谱柱为岛津Shim-pack CLC-ODS(6mmID×15cm,5μm)。流动相为乙腈:磷酸盐缓冲液(50:50,v/v),磷酸盐缓冲液为 0.01MNaH2PO4:0.01MNa2HP04=95:5,流速 1.2mL/min。紫外检测波长为240nm。柱温为35℃。筛选2012-2014年期间接受EFV 600mg联合TDF、3TC治疗方案、规律随诊、自愿签署知情同意书的494例单纯HIV感染(n=425)、HIV/HBV(n=55)及HIV/HCV共感染者(n=14),于服药后8-20 h内抽取外周静脉血5 mL并分离血浆,应用HPLC方法测定人血浆EFV浓度,并详细记录患者治疗前及每次随访时的基本情况、肝功能生化指标、VL及T淋巴细胞亚群计数等结果,分析不同组别患者间EFV血药浓度、临床疗效及主要肝功能生化指标的变化并进行统计学比较。将服用EFV400mg达稳态的8名患者收住入院,于服药前(0h)以及服药后1,2,3,4,5,6,8,10,12,24h采集静脉血并分离血浆冻存于-60℃条件下,运用本研究建立的HPLC方法测定患者EFV血药浓度,应用WinNonlin软件进行模型判定、数据拟合及PK参数计算。选取服用EFV400mg联合治疗方案并规律随诊的患者24例,采用HPLC方法测定随访第4周、12周、24周和48周EFV血浆浓度,同时检测VL、T淋巴细胞亚群、血常规、肝肾功能等指标,并通过问卷调查收集患者CNS相关不良反应的数据,分析EFV浓度与病毒学抑制及不良反应的关系。研究结果所建立的测定人血浆中EFV浓度的HPLC方法在0.1-10μg/mL范围内线性良好(r=0.9996),低、中、高浓度质控样本(0.2,2,9μg/mL)的批内、批间变异分别为1.90%-2.41%(n=10)和2.88%-3.99%(n=5),方法学回收率和提取回收率分别为 98.22%-105.00%(n=3)和 53.81%-67.42%(n=3)。中国艾滋病患者使用EFV600mg联合TDF、3TC治疗达48周时,单纯HIV感染、HIV/HBV、HIV/HCV 组 EFV 血药浓度分别为 3.781(3.012-4.980)mg/L、3.057(2.040-5.144)mg/L、2.557(2.212-4.334)mg/L(p<0.05),病毒学部分及完全抑制的比例分别为78.59%、76.36%、100.00%,而CD4+细胞计数分别从基线的 290±118、273±120、282±134 cells/mm3 上升到了 48 周的 442±184、457±221、391±151 cells/mm3(p<0.05),肝功能生化指标则总体保持在正常值范围内,且三组间无统计学差异。运用WinNonlin软件计算EFV 400mg PK参数发现,EFV符合二室模型(n=7),计算的PK参数分别为Tmax2.938±1.483h、Cmax2.532±0.652mg/L、AUC 53.197±13.468 mg·h/L、t1/2 51.255±19.942 h 和 CL/F 8.067±2.567 L/h。EFV 400mg 的非房室模型 PK 参数(n=8)分别为 Tmax3.875±2.748 h、Cmax3.883±0.967mg/L、Ctrgh 1.484±0.422 mg/L、AUC 50.754±11.140 mg·h/L、t1/2 30.581±15.589 h 和 CL/F 4.145±2.285 L/h。EFV 400mg药效学研究发现,入组患者4周、12周、24周及48周血药浓度分别为 1.989±0.706、1.729±0.429、2.054±0.690、1.963±0.576mg/L(p>0.05),94.12%(64/68)的随访时间点EFV浓度能保持在1-4mg/L的推荐治疗范围内。随着治疗的推进,患者CD4+计数不断上升,VL显著降低,12周时已有78.26%(18/23)的患者实现病毒学部分/完全抑制,完成24周随访的16名受试者则全部达到病毒完全抑制状态。此外,这些患者的血常规、肝肾功能指标相较基线无明显改变。头晕是本次研究最常见的CNS不良反应,治疗达两周以上即可逐步耐受甚至症状消失。研究结论本研究所建立的人血浆中EFV浓度的HPLC测定方法灵敏度高、稳定性好、操作简便易行,可满足临床需求。HIV/HBV、HIV/HCV共感染患者服用EFV 600mg后不会出现药物蓄积,EFV 600mg联合TDF、3TC治疗方案安全有效。中国HIV/AIDS感染患者服用EFV 400mg达稳态后,其t1/2较白色人种及黑色人种患者有所延长,Cmax增高,CL/F明显较低,其余PK参数则与国外研究报道相似。对接受400mg给药方案的患者进行长期观察发现,患者免疫重建顺利,疗效理想,服药后8-20 h内的血浆药物浓度基本保持在1-4 mg/L的推荐治疗窗内,且不良反应持续时间较600mg治疗方案有所缩短,患者耐受性提高。EFV400mg一日一次给药方案在中国HIV/AIDS患者中可进一步推广。