【摘 要】
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维生素K2是一种具有生物活性的天然存在的K族维生素，主要由微生物产生，具有预防治疗骨质疏松症和肝癌、治疗维生素K缺乏性出血症、促进凝血酶原的形成等功能，有很大的医用价值。
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维生素K2是一种具有生物活性的天然存在的K族维生素，主要由微生物产生，具有预防治疗骨质疏松症和肝癌、治疗维生素K缺乏性出血症、促进凝血酶原的形成等功能，有很大的医用价值。 本文首先对维生素K2生产菌株Bacillus subtilis(natto)-2-6进行了亚硝基胍(NTG)诱变和低能氮离子注入诱变，并且探索了诱变处理条件，得出最佳诱变条件分别为:NTG诱变，200 mg/L、20 min; N+注入，15 keV，80(×2.6×1013 N+/cm2)。经过NTG诱变后得到突变株BN-N30-1，其维生素K2的产量提高了53％，继而采用低能N+注入技术进行处理得到突变株BN-P15-11-1，维生素K2的产量比BN-N30-1提高了96％，比原始菌株提高了166％。 然后对突变株BN-P15-11-1的培养条件进行了单因素优化，并采用响应面法对发酵培养基进行了优化，得到了发酵产维生素K2的最佳培养基和培养条件:甘油(69.6 g/L)、蔗糖(34.5 g/L)、K2HPO4(0.4 g/L)、蛋白胨(20 g/L)、酵母提取物(25g/L)，pH7.3，500 mL三角瓶装液量为50 mL，接种量为10％，摇床转速为150 r/min，37℃培养72h。优化之后，BN-P15-11-1维生素K2的产量达到3.593±0.107 mg/L，较优化前提高了55％。 由于甘油在维生素K2发酵过程中起着重要的作用，因此采用分批补加甘油的方法对突变株BN-P15-11-1进行补料发酵的初步研究。实验发现当初始甘油浓度为9.6 g/L、12h补加20 g/L、48 h补加40 g/L时，维生素K2的产量可达6.519 mg/L，是分批发酵时的1.86倍，表明补料-分批发酵是提高维生素K2产量的有效手段。
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