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目的:1、观察Kiss-1基因过表达对结直肠癌细胞增殖能力、侵袭和迁移能力的影响。2、探索Kiss-1基因在结直肠癌细胞中的可能相关信号转导通路。方法:1、采用q RT-PCR的方法从五株人结直肠癌细胞Lo Vo、SW480、HT-29、HCT116、SW620中筛选出Kiss-1基因m RNA的表达水平最低者,备用。2、构建携带Kiss-1基因的慢病毒载体及空载体,并分别感染Kiss-1基因低表达细胞株。采用q RT-PCR和Western-blot的方法分别检测原株HCT116细胞、空载体转染细胞株及慢病毒转染细胞株中Kiss-1基因产物m RNA及其蛋白Metastin表达水平。并将三株细胞分别分为:空白对照组(CON组)、空载体对照组(NC组)、过表达组(OE组)。3、采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)和Transwell小室法分别检测Kiss-1基因转染前后细胞的增殖能力、侵袭及迁移能力的变化。4、应用Western-blot法检测三组细胞中PKC信号通路的关键分子PKCα、PKCβII表达量的变化以及下游效应蛋白E钙粘蛋白表达量的变化。5、应用Western-blot法检测三组细胞中Rho/Rho激酶信号通路中关键分子Rho A表达量的变化。结果:1、在Lo Vo、SW480、HT29、HCT116、SW620人结直肠癌细胞株中,经q RT-PCR显示,在此5株人结直肠癌细胞株中Kiss-1基因表达丰度均为中度,但是Kiss-1基因在HCT116细胞株中表达量相对最少(P<0.01)有统计学意义,而在SW620细胞株中表达量最高(P<0.01)有统计学意义。2、包装有Kiss-1基因的慢病毒感染HCT-116细胞后,能够稳定表达报告基因EGFP,荧光率均>80%,并且q RT-PCR和Western-blot显示慢病毒转染细胞株中Kiss-1基因产物m RNA及其蛋白Metastin表达均明显升高,均存在统计学意义(P<0.05)。3、CCK-8法检测显示:与CON组、NC组相比,OE组细胞增殖能力明显下降,有统计学意义(P<0.05);Transwell小室实验显示:与CON组、NC组相比,OE组细胞侵袭能力、迁移能力亦明显下降,均存在统计学意义(P<0.05)。4、Western blot检测结果显示:与CON组及NC组相比,OE组PKCα的表达水平无明显变化,无统计学意义(P>0.05);PKCβII的表达水平显著下降,有统计学意义(P<0.05);E钙粘蛋白表达含量明显升高,具有统计学意义(P<0.05)。5、Western blot检测结果显示:与CON组、NC组相比,OE组Rho A表达水平无明显改变(P>0.05)。结论:1、在Lo Vo、SW480、HT29、HCT116、SW620人结直肠癌细胞株中,HCT116细胞Kiss-1基因表达相对最低。2、包装有Kiss-1基因的慢病毒转染HCT116细胞后能够稳定过表达。3、Kiss-1基因能抑制人结直肠癌HCT116细胞增殖能力、侵袭能力、迁移能力。4、Kiss-1基因抑制结直肠癌转移与PKC信号转导通路相关,可能通过上调下游蛋白E钙粘蛋白的表达而发挥作用。5、Kiss-1基因抑制结直肠癌的转移可能与Rho/Rho激酶信号转导通路无关;或可能与该通路其他关键分子有关。