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洛克沙胂（Roxarsone,ROX）是有机砷制剂的一种,由于它具有抗球虫,促进生长等作用,被广泛应用于畜禽养殖中。但随着科学技术的发展,人们逐渐意识到了ROX带来的不良影响,欧盟、美国、中国都相继禁止ROX的使用或者规定了ROX的最低检测限,因此必须建立ROX的快速检测方法。目前检测ROX最常用的方法仍是仪器检测法,包括色谱法和质谱法等,但这些方法需要昂贵的仪器设备,且需专业人员进行操作;而免疫学快速检测方法具有快速,特异,且能大批量检测样品的特点,对ROX的现场快速筛查具有重要的意义。优质的抗体是建立免疫学快速检测方法的关键,目前针对ROX的免疫学快速检测方法主要是以多克隆抗体作为检测抗体,尚未有ROX单克隆抗体检测产品的相关报导。本研究旨在研制出高特异性、高灵敏度的抗体,为建立ROX免疫学快速检测方法打下基础。本研究以ROX的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸（HAPA）作为ROX的替代物,用碳二亚胺（EDC）将BSA与HAPA通过酰胺键相连,制备人工合成抗原HAPA-BSA;用戊二醛将OVA与HAPA的伯氨基相连,制备用于检验的包被抗原HAPA-OVA。用紫外扫描、SDS-PAGE鉴定合成的HAPA-BSA和HAPA-OVA,结果证明HAPA与BSA、OVA分别连接成功。用HAPA-BSA免疫3只小鼠,收集四次免疫后血清,测定效价为1:6.4×103,IC50值为63.533μg/mL。利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,有限稀释法对阳性细胞亚克隆,筛选出一株可以稳定分泌抗ROX抗体的杂交瘤细胞株,命名为3G12。收集3G12细胞株培养液,间接ELISA测定效价为1:5.12×102,IC50值为3.147μg/mL。随后以腹腔诱生腹水法大量制备单克隆抗体,收集腹水并用辛酸-硫酸铵法纯化,SDS-PAGE结果表明纯化后条带单一;间接ELISA测定纯化前后腹水效价,结果显示纯化前后腹水效价均可达到1:1.024×105,纯化后腹水的IC50值为1.433μg/mL。综上所述本研究成功研制得到了抗ROX的单克隆抗体,为建立ROX的免疫学快速检测方法奠定了基础。