电刺激对脑梗死大鼠运动功能和Rho激酶表达的影响

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背景及目的:随着人口老龄化的日益增长和生活节奏的加快,脑梗死已成为目前严重威胁中老年人健康的主要疾病之一。尽管医疗水平的不断提高和医疗条件的不断改善,脑梗死的死亡率明显降低,但脑梗死后严重的神经功能障碍后遗症(如:偏瘫、失语、视力障碍、吞咽困难、智能障碍、抑郁等)给患者、家庭及社会带来沉重的负担。为提高患者的生活质量,探索有效的治疗措施成为研究的热点。已有许多研究表明,电刺激可促进脑梗死后大鼠肢体运动功能及学习记忆能力恢复,然而,传统的电刺激治疗,主要是刺激患侧肢体,而患侧和健侧同时进行电刺激研究极少。临床研究发现,脑梗死后双侧电刺激对偏瘫肢体的功能改善优于单侧,但其具体的分子机制仍不清楚。本实验探讨单侧与双侧电刺激对脑梗死大鼠偏瘫肢体运动功能恢复和Rho激酶表达的影响,可能为电刺激在脑梗死治疗及康复中的应用提供新的理论依据。方法:选择健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,制作左侧大脑中动脉闭塞模型(MCAO),将造模成功的大鼠随机分为对照组、单侧电刺激组、双侧电刺激组、假手术组各36只,每组再分为治疗3 d、7d、14d和21d 4个亚组(3d与21d亚组各12只,7d和14亚组各6只),对照组、单侧电刺激组、双侧电刺激组于脑梗死后每天接受自然恢复、单侧电刺激或双侧电刺激治疗3d、7d、14d和21d,各组每刺激6d,休息1d,3d除外。并在上述时间点,各组取6只大鼠,进行走平衡木试验观察大鼠偏瘫肢体运动功能恢复情况,然后断头处死动物取脑,石蜡包埋切片行Rho激酶免疫组织化学染色,检测梗死灶周围皮质及正常大脑皮质Rho激酶的表达变化规律。另外3d与21d亚组在相应时间点各取6只大鼠,快速断头取脑行TTC染色以检测脑梗死灶体积的变化。结果:对照组第14d时肢体功能较前有所改善(p<0.05)。治疗第7 d、14 d和21 d时,单侧电刺激组和双侧电刺激组BWT评分较对照组显著增高(p<0.05),并且治疗第14 d、21d时双侧电刺激组BWT评分明显高于单侧电刺激组(p<0.05)。对照组第7d时脑梗死周边区Rho激酶的表达开始升高,第14d时达到高峰,第21d时仍持续表达且高于第7d时的水平。电刺激治疗第14d、21d时,Rho激酶表达产物与对照组相比明显下降(p<0.05),且双侧电刺激组较单侧电刺激组下降更明显(p<0.05)。电刺激组第21d时梗死灶体积较对照组明显缩小(p<0.05),然而单侧电刺激组与双侧电刺激组无明显差异(p>0.05)。结论:1.大鼠左侧MCAO造模成功后,对照组14d时大鼠偏瘫肢体功能较前有所改善,说明急性脑梗死后运动功能存在着自然恢复过程。2.早期电刺激治疗能够促进脑梗死大鼠偏瘫肢体运动功能恢复,能够下调脑梗死周边区Rho激酶的表达,双侧电刺激效果优于单侧电刺激;能够缩小梗死灶体积,双侧电刺激与单侧电刺激无明显差异。3.早期电刺激治疗能够促进脑梗死大鼠偏瘫肢体运动功能的恢复,并且能够缩小梗死灶体积,可能与下调梗死灶周边区Rho激酶的表达有关。
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