【摘 要】
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目的: 探讨直流电毁损大鼠锥体束致痉挛性脑瘫动物模型的有效制备方法,观察脑性瘫痪大鼠的痉挛性瘫痪肢体肉毒毒素注射后,局部肌肉神经超微结构变化特点。为临床合理应用肉
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目的:
探讨直流电毁损大鼠锥体束致痉挛性脑瘫动物模型的有效制备方法,观察脑性瘫痪大鼠的痉挛性瘫痪肢体肉毒毒素注射后,局部肌肉神经超微结构变化特点。为临床合理应用肉毒毒素治疗脑瘫及拓展肉毒毒素临床应用范围,提供重要的组织形态学研究依据。
方法:
1、首先探讨用直流电毁损大鼠锥体束制备脑瘫动物模型实验电流剂量。将18只大鼠随机分为3组:组1:电流值1.5MA,1分钟,刺激1次;组2:电流值2MA,30秒,刺激2次,间隔30秒;组3:电流值2.5 MA,30秒,刺激2次,间隔30秒;然后选择一合适剂量做为实验剂量。再取150只大鼠随机分为正常对照组A:30只,对照组B:40只,实验组C:50只,实验组D:30只,对照组B及各实验组均以试验剂量制备脑瘫模型,对照组A开颅钻孔但不予电流刺激。
2、选成功模型为实验对象,实验组C,D:局部注射肉毒毒素6u/kg/组肌群,对照组B注射等量生理盐水,对照组A不注射。注射部位为瘫痪的右下肢腓肠肌。实验组D于注射后第二天开始进行跑动锻炼。
3、正常对照组A,及对照组B,实验组C,于注射后3天、7天、15天、30天、90天,实验组D于15天、30天、90天,进行神经行为学检测后,对右下肢小腿腓肠肌组织进行肌肉活检,通过光镜、透射电镜观察局部肌肉神经超微结构变化特点。
结果:
1、用直流电毁损大鼠锥体束制备脑瘫动物模型时,在最初所采用的电流值中,以电流值2.5 MA,30秒,刺激2次,间隔30秒组成功率最高。
2、脑瘫鼠肉毒毒素治疗后神经行为学改变:实验组C、D与对照组B比较,7天组、90天组有显著性差异,15天,30天组有非常显著性差异。实验组C、D间比较,15天、30天组无显著性差异,90天组有显著性差异。
3、电镜下,脑瘫肉毒毒素治疗组(实验组C)虽然早期肌肉萎缩程度及肌纤维结构破坏(Z线断裂、紊乱、消失、肌丝溶解、三联管紊乱、空泡变性)情况均较脑瘫未治疗组(对照组B)严重且出现时间早。但后期有肌纤维代偿性肥大。
4、痉挛性瘫痪下肢注射肉毒毒素后7-15天无髓神经纤维附近可见神经递质小泡聚集,但无突触前膜样结构包裹。15-30天可见可疑终板样结构,即细胞膜局部出现较多深而密的皱褶,皱褶处可见较多成簇的性质不明的深染颗粒,但未见神经递质小泡,也无明显的突触前膜样结构。
5、脑瘫肉毒毒素治疗辅以运动组(实验组D)与实验组C比较,90天肌细胞可见明显肥大,肌节、肌丝结构大致正常。
结论:
1、直流电2.5 MA,30秒,刺激2次,间隔30秒毁损大鼠锥体束可很好地制备痉挛性脑瘫动物模型。
2、大鼠痉挛性瘫痪下肢注射肉毒毒素后7天下肢痉挛症状出现改善,15-30天达到最大改变,90天复又出现痉挛瘫痪症状。但辅以锻炼组下肢痉挛症状改善明显优于未锻炼组。
3、肉毒毒素治疗可使痉挛肌肉得以从痉挛状态下松弛下来,为其日后肌纤维结构的修复(肌肉代偿肥大)创造了条件。锻炼可促进肌肉的修复。
4、肉毒毒素注射后可诱发神经芽生,还可造成运动终板退变。
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