幽门螺杆菌16SrDNA指纹图和PCR-RFLP基因分型研究

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基于Hp表型特征的一致性及基因组结构高度变异性的特点,该研究应用16SrDNA指纹图技术和尿素酶C基因的PCR-RFLP法,对临床分离的14株Hp进行基因分型,希望从Hp的基因水平上来探讨其与不同疾病结局的关系.结论:1、PCR掺入法制备16SrRNA基因探针,方法简便,探针产量高,无需提纯,可直接用于杂交.2、16SrRNA指纹图技术和ureC基因的PCR-RFLP法重复性好,分辨力高.16SrRNA指纹图谱较UREC基因的PCR-RFLP谱型更敏感的表达Hp各菌株的变异,以准确有效地对Hp作出基因分型.3、差异显著的DNA指纹图谱说明了不同Hp菌株间基因组结构的高度变异性.4、本研究中单一方法的分型结果均未很好地表示出不同Hp基因型别与不同疾病结局的相关性.5、两种方法的综合分析结果从多基因水平上提示不同Hp基因型别可能与不同的疾病结局相关.有等增加样本例数进一步从多基因水平上证实Hp基因型与疾病结局的相关性.6、首次显示国内HP的16SrRNA指纹图谱示意图,作为一种标准方法建立的标志.并和ureC基因的PCR-RFLP谱型与统计学分析软件相结合,进行聚类分析,将14株Hp在基因水平上分为三型.这在国内也属首次.7、Hp的分型应从多基因、多方法着手,结合统计学聚类分析,建立一套分子生物学数值分类体系,这样才能真正提示Hp基因型别与疾病结局的关系.这将为Hp的防治提供新的方向.
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