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目的:以改变饮食中的蛋白质浓度作为干预因素,长期饲养中老年小鼠,通过检测各组小鼠肝脏和结肠的组织学改变,以及脾脏淋巴细胞含量的变化情况,来探究低蛋白饮食对中老年小鼠非特异性炎症反应的影响,并简要探究这一过程可能的机制。方法:将14月龄健康雌性KM小鼠随机分为四组,分别为对照组、低蛋白组、高蛋白组、高蛋白+雷帕霉素组。对照组给予标准小鼠饲料,低蛋白组给予低蛋白饮食,高蛋白组给予高蛋白饮食,高蛋白+雷帕霉素组在给予高蛋白饮食的同时隔日腹腔注射雷帕霉素(2mg/Kg)。实验时间为三个月,实验期间所有小鼠自由进食进水。实验三个月末使用颈椎脱臼法处死小鼠,取小鼠的肝脏、结肠和脾脏组织。使用HE染色观察各组中老年小鼠肝脏和结肠的组织学改变,使用免疫组织化学检测法检测肝脏组织CD68和mTOR蛋白的表达情况,使用流式细胞术检测脾脏CD4~+T、CD8~+T细胞百分比,使用免疫印迹法检测肝脏mTOR蛋白的表达水平。结果:1.中老年小鼠肝组织中肝小叶结构依然完整,但肝细胞胞浆疏松淡染,肝窦广泛扩张,长期低蛋白饮食可以减轻中老年小鼠肝脏的以上改变,高蛋白饮食作用相反,雷帕霉素可抑制高蛋白饮食对中老年小鼠肝脏组织的不利影响。2.长期低蛋白饮食能够显著降低中老年小鼠肝脏组织中CD68分子的表达,高蛋白饮食作用相反,雷帕霉素能够有效抑制高蛋白饮食的作用,高蛋白+雷帕霉素组CD68分子的表达水平降低。对照组、低蛋白组、高蛋白组、高蛋白+雷帕霉素组CD68的OD值依次为0.21±0.01、0.18±0.01、0.29±0.02、0.15±0.02。3.中老年小鼠结肠组织中肠粘膜改变,隐窝变浅,柱状上皮细胞缺损,杯状细胞数量增多,长期低蛋白饮食能够减轻中老年小鼠结肠粘膜以上改变的发生,长期高蛋白饮食作用相反,但高蛋白饮食的作用可被雷帕霉素抑制。4.中老年小鼠脾脏CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞数量明显减少,长期给予低蛋白饮食可使其数量增加。对照组、低蛋白组、高蛋白组、高蛋白+雷帕霉素组的脾脏CD4~+T淋巴细胞百分比依次为26.61%±2.92%、37.35%±1.53%、28.84%±2.83%、40.86%±1.13%;脾脏CD8~+T淋巴细胞百分比依次为10.73%±1.30%、19.53%±2.61%、13.21%±0.98%、19.04%±0.61%。5.长期低蛋白饮食可显著降低中老年小鼠肝脏中mTOR蛋白的表达。对照组、低蛋白组、高蛋白组、高蛋白+雷帕霉素组的免疫组织化学结果(mTOR的OD值)依次为0.16±0.02、0.09±0.02、0.23±0.02、0.11±0.01,Western blot结果(mTOR/GAPDH)依次为1.11±0.15、0.70±0.05、1.17±0.37、0.45±0.14。结论:长期给予中老年小鼠低蛋白饮食后,小鼠肝脏组织结构的时间相关性改变减轻、库普弗细胞减少,结肠粘膜上皮细胞的时间相关性改变减轻、淋巴细胞浸润减少,脾脏CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞百分比上升,说明长期低蛋白饮食具有延缓衰老的作用,其机制可能与低蛋白饮食下调了组织中mTOR蛋白的表达有关。