高糖对myocardin和SM α-actin在大鼠肾小球系膜细胞中表达的影响

• 作 者: 李铭
• 机 构: 南开大学
• 出 处: 南开大学
• 发表日期: 2012年期
• 关键词: 肾小球系膜细胞 SM α-actin蛋白 myocardin核转录因子 MAPK信号通路 糖尿病性肾病

目的：目前，糖尿病性肾病是导致终末期肾病的主要原因之一。在糖尿病性肾病发病早期，伴随肾小球高滤过率，早期超滤症状的出现将引发蛋白尿的增加，进而发展为临床上的肾病。而肾小球系膜细胞能调节肾小球毛细血管表面积的大小，其收缩功能的下降是导致糖尿病肾病中超滤现象的原因。因此，对该疾病早期发病机制的研究将成为预防和治疗该疾病的关键。由于肾小球系膜细胞可以表达平滑肌特异性的收缩蛋白SMα-actin，我们在实验初期也证实了系膜细胞中也表达调控平滑肌收缩表型的核转录因子myocardin。因而我们用高糖处理体外培养的肾小球系膜细胞，模拟糖尿病患者机体内高糖血症的环境，在此基础上研究myocardin及其下游的靶蛋白SMα-actin在大鼠肾小球系膜细胞中表达及功能。　　
方法：用DMEM低糖培养基培养大鼠肾小球系膜细胞系(HBYZ-1)至细胞密度达到70％后，饥饿24h，分别以D-葡萄糖(30 mM)、L-葡萄糖(30 mM)和甘露醇(30 mM)处理24小时后，提取细胞总mRNA用实时定量.聚合酶链反应(Real-time Polymerase chain reaction，Real-time PCR)检测myocardin和SMα-actin的mRNA表达水平，提取细胞总蛋白用蛋白质印迹(western blot)的方法检测myocardin和SMα-actin的蛋白表达水平以及MAPK信号通路的相关蛋白的激活。　　
结果：1.高糖可以升高myocardin和SMa-actin的mRNA表达水平，但是降低SMα-actin的蛋白表达水平；2.甘露醇可以升高SMα-actin的mRNA表达水平降低SMα-actin的蛋白表达水平，但对myocardin的mRNA表达水平没有作用；3.L-葡萄糖对myoeardin和SMα-actin的表达没有明显作用；4.高糖和甘露醇都可以在5 min时激活MAPK信号通路；5.MAPK信号通路被阻断后，在高糖和甘露醇处理下SMα-actin的蛋白表达水平恢复。　　
结论：　　
1.肾小球系膜细胞中有myocardin的表达，高糖作用下使myocardin和SMα-actin的mRNA水平上调，使SMα-actin的蛋白表达水平下降；　　
2.高糖对系膜细胞中SMα-actin的调节作用与MAKP信号通路有关，在MAPK信号通路被抑制后SMα-actin蛋白表达水平恢复。