提高油菜芽苗分化频率及其无性系变异研究

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采用MS基本培养基,附加不同组合的激素对2个甘蓝型油菜(B.napus L.)和2个白菜型油菜(B.campestris L.)的不同外植体进行培养,其中特别比较了AgNO<,3>、水解酪蛋白和谷氨酰胺对芽苗分化的促进作用,以期获得影响芽苗分化的必要因素.同时,对分化的植株进行了无性系变异观察及过氧化物同工酶电泳分析.主要研究结果如下:1.愈伤组织随着时间的进程,在结构、颜色、大小等有较大的变化.在分化培养时,甘油型油菜选取诱导培养16天的愈伤组织,白菜型油菜选取诱导培养8天的愈伤组织,分化效果较好;2.AgNO<,3>能大幅度地提高分化频率,DH5的四类外植体平均提高了22%,特别与水解酪蛋白和谷氨酰胺结合使用效果更好,分别提高了29.6%和28.4%,其中子叶提高的幅度最大,达35.8%.此外,AgNO<,3>也能提高花药培养的分化频率,从3%左右提高到22.4%;3.甘蓝型油菜较白菜型油菜的再生能力强.前者最佳的激素组合为6-BA+NAA,后者为ZT+IAA.在外植体中,花丝和下胚轴都有较高的分化能力,且花丝能在诱导培养时5%的花丝从基部直接分化出小芽,于是用于遗传转化更有优势;4.切取叶子不同部位培养,E1(子叶柄)的分化频率最高,在MS1分化培养基上达26.7%;5.通过对无性系变异观察和同工酶检测,体细胞无性系的变异率高于配子体无性系的变异率.
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