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目的:神经母细胞瘤(Neuroblastoma, NB)是严重危害人类生命健康的交感神经系统的恶性肿瘤,具有高度侵袭性,且化疗后极易发生多药耐药,因此寻求一种高效、降低耐药发生率的新型药物成为必要。苦参碱(Matrine, Ma)是从中药苦参(sophora flavescentait)的干燥根中提取的具有广泛药理作用的活性物质,它具有抗感染、抗过敏、增强机体免疫力、保肝等作用。最近研究显示苦参碱对多种恶性肿瘤细胞有明显的诱导凋亡作用,尚未见它对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株的实验研究。本文即通过相关实验方法来研究苦参碱对SH-SY5Y细胞的作用及机制。
方法:取对数生长期的细胞,分为对照组(含细胞无Ma)及4个浓度组(Ma的作用浓度)分别为0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml和3.0mg/ml,每组5个复孔。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测NB SH-SY5Y细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测凋亡率;RT-PCR方法检测TrkA mRNA的表达。最后采用SPSS16.0统计软件进行单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。
结果:MTT比色法检测对照组及各浓度组增殖抑制率分别为(7.25±1.55)%、(12.56±1.94)%、(17.22±0.90)%、(22.39±0.78)%和(25.35±1.38)%;流式细胞仪检测对照组及各浓度组凋亡率分别为(5.30±0.60)%、(10.04±1.18)%、(14.34±1.79)%、(21.36±0.96)%和(24.80±1.53)%;RT-PCR方法检测TrkA mRNA的表达,对照组及各浓度组的灰度值分别为:0.502±0.043,0.584±0.032、0.644±0.052、0.836±0.056和0.948±0.030。以上检测各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论:苦参碱在体外环境下作用于NB SH-SY5Y细胞,可以有效抑制该细胞的增殖、诱导调亡、并促进TrkA mRNA的表达,且在一定浓度范围内,其作用随浓度的增长逐渐增强。