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目的：1、系统分析1985年至2011年在江苏省血液研究所经细胞遗传学或融合基因检查确诊的842例初诊核心结合因子相关急性髓系白血病(CBF-AML)患者的临床、实验室及细胞遗传学特征。2、检测235例初诊CBF-AML患者中酪氨酸激酶相关基因（KIT、FLT3、JAK2V617F、RAS、CBL）基因突变，分析基因突变、染色体易位的相关性，阐述细胞和分子遗传学异常在CBF-AML发生中的意义。3、对122例初诊t(8;21)AML患者进行了回顾性分析，探讨残余正常中期分裂相对t(8;21)AML预后的影响。方法：1、842例CBF-AML患者均采用骨髓细胞直接法或短期培养法制备染色体悬液，采用R显带进行核型分析，分析CBF-AML患者细胞遗传学的特点。2、应用聚合酶链反应（PCR）扩增基因组DNA及PCR产物双向测序的方法分析了235例CBF-AML患者KIT基因突变、202例患者FLT3基因突变、197例患者JAK2V617F基因突变及183例患者RAS、CBL基因突变的发生率，综合分析各基因突变对CBF-AML患者临床特征及预后的影响。3、回顾性分析了122例初诊t(8;21)AML患者残余正常中期分裂相的特点，探讨残余正常中期分裂相对t(8;21)AML预后的影响。结果：1、单中心842例初诊CBF-AML患者的临床、实验室及细胞遗传学特征842例CBF-AML患者中， t(8;21)/RUNX1-RUNX1T1748例(89%)， inv(16)/t(16;16)/CBFβ-MYH1194例(11%)。其中，男性479例，女性363例，男女患者比例为1.32:1，两组中男性患者的比例均高于女性患者。中位年龄35(1-83)岁，儿童60例，成人782例。按FAB诊断标准，842例CBF-AML患者中M1型49例，M2型577例，M4型86例（其中M4Eo60例），M5型13例，未分类AML亚型(unclassified AML)117例。t(8;21)AML患者FAB分型以M2型为主，占76.1%，而inv(16)AML患者主要为M4Eo，占63.8%。两组病例的临床和实验室资料统计分析后发现，在中位白细胞(WBC)计数方面，inv(16)AML>t(8;21)AML(35.8>10.0×10~9/L)；在中位血红蛋白(HB)计数方面，inv(16)AML>t(8;21)AML(81>63g/L）；在中位骨髓原始细胞比例方面， inv(16)AML>t(8;21)AML(56>48.8%)；在中位年龄、性别比、PLT计数方面，两组之间均无统计学差异(P>0.05)。842例CBF-AML患者中，99.8%(840/842)的患者核型分析成功，其中t(8;21)732例，inv(16)51例、t(16;16)1例。732例t(8;21)AML患者中414例(56.6%)除有t(8;21)异常外，还伴有其他附加染色体异常。最常见的为性染色体缺失，-Y为236例，占男性核型55.9%，而-X为74例，占女性核型22.7%；其次是del(9q)，有53例(7.2%)；+4有27例(3.7%)；+8有14例(1.9%)；+22有2例(0.3%)；其他附加染色体异常有70例(9.6%)；t(8;21)复杂变异异位20例(2.7%)。染色体核型分析未检出t(8;21)患者有16例，但均可经RT-PCR检测到RUNX1-RUNX1T1融合基因，其核型表现为正常核型6例，其他异常核型8例，2例核型分析未见分裂相。t(8;21)AML患者的诱导化疗早期缓解率较高(85.8%)，生存期较长(中位生存期33.1个月)，附加染色体异常中+4组预后较差，与其他组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。52例inv(16)/t(16;16)中16例(30.8%)除有inv(16)/t(16;16)异常外，还伴有其他附加染色体异常。最常见的为+22，有15例(28.8%)；-X有1例(1.9%)；其他附加染色体异常有3例(5.8%)。染色体核型分析未检出inv(16)/t(16;16)患者42例，但经RT-PCR或/和FISH均检测到了CBFβ-MYH11融合基因，其核型表现表现为正常核型34例，其他异常核型8例。此组患者的诱导化疗早期缓解率较高(91.5%)，生存期较长(中位生存期38.6个月)，附加染色体异常中+22组预后较好，与其他组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。2、CBF-AML患者中常见基因突变的临床和实验室特征235例CBF-AML患者均进行了酪氨酸激酶相关基因基因突变的检测，中位年龄35(9-77)岁，男女患者比例为1.18:1。其中，t(8;21)/RUNX1-RUNX1T1181例(77%)，inv(16)/t(16;16)/CBFβ-MYH1154例(23%)。235例患者中79例(33.6%)存在KIT基因突变，均为错义突变。其中69例为17号外显子突变，8例为8号外显子突变，2例8号与17号外显子均有突变。181例t(8;21)AML患者mutKIT发生率为37.7%(68/181)，54例inv(16)AML患者mutKIT发生率为20.4%(11/54)，两组患者mutKIT发生率存在统计学差异(P<0.05)。但较之于t(8;21)AML患者，mutKIT8在inv(16)AML患者中更多见(P=0.001)。KIT基因突变类型主要表现为点突变或复杂的插入、缺失型突变两大类型，包括：6种点突变，4种插入缺失型突变，在这些突变中最常见的是位于KIT激酶功能域的D816突变占57.0%(45/79)。202例CBF-AML患者中21例存在FLT3基因突变，突变率为10.4%，其中12例为FLT3点突变，9例为FLT3-ITD突变。t(8;21)AML与inv(16)AML两组mutFLT3发生率差异无统计学意义(P>0.05)。183例CBF-AML患者中16例存在RAS基因突变，突变率为9.7%，其中13例为N-RAS基因突变，2例为K-RAS基因突变，1例同时存在N-RAS和K-RAS基因突变；143例t(8;21)AML患者mutRAS发生率为6.5%(9/143)，40例inv(16)AML患者mutRAS发生率为17.5%(7/40)，两组患者mutRAS发生率存在明显差异(P<0.05)。183例CBF-AML患者中6例存在CBL基因突变，突变率为3.3%，累及到8号外显子5例，点突变1例，插入和缺失突变4例，累及到9号外显子1例，为点突变。197例CBF-AML患者中仅有2例存在JAK2V617F基因突变，突变率为1.0%，2例突变均发生在t(8;21)AML患者，而在inv(16)AML患者中未检测出该基因突变。KIT突变型(KIT-mut)与野生型(KIT-wt)患者相比较，前者外周血WBC计数较高(P<0.05)，PLT计数较低(P<0.05)，两组的中位年龄、性别比、Hb水平、骨髓原始细胞比例差异无统计学意义。FLT3-mut组与FLT3-wt组患者相比较，前者外周血WBC计数较高(P<0.05)，两组的中位年龄、性别比、Hb、PLT、骨髓原始细胞比例方面没有统计学差异。RAS-mut组及RAS-wt组、CBL-mut组及CBL-wt组在中位年龄、性别比、WBC、Hb、PLT、骨髓原始细胞比例方面的差异均无统计学意义。由于JAK2V617F突变例数较少，临床资料不完整，因此未做相关分析。KIT-mut组中位生存期明显短于KIT-wt组(16versus51.8个月，P<0.05)；KIT-mut组3年无复发生存率也是明显短于KIT-wt组(46.3%versus58.5%，P<0.05)。FLT3-mut组及FLT3-wt组、RAS-mut组及RAS-wt组、CBL-mut组与CBL-wt组在CR率、总生存期、无复发生存期方面的差异均无统计学意义(P>0.05)，但是单独FLT3-ITD对总生存期具有不良预后作用。3、122例初诊t(8;21)AML的残余正常中期分裂相及其预后分析122例初诊t(8;21)AML患者中44例(36.1%)存在残余正常中期分裂相，残余正常中期分裂相数目从11个中的1个到23个中的19个。78例t(8;21)AML无残余正常中期分裂相与44例t(8;21)AML伴残余正常中期分裂相患者相比，外周血WBC计数(10.2×10~9/L和6.3×10~9/L;P=0.043)、骨髓原始细胞比例(54.5%和42.5%;P=0.013)、染色体伴随异常del(9q)发生率(4.0%和8.0%;P=0.045)等指标差异有统计学意义。而在初诊年龄、性别比、HB、PLT、FAB分型及染色体伴随异常（除外del(9q)）方面差异无统计学意义(P>0.05)。86例初诊t(8;21)AML患者中合并基因突变的患者41例(47.7%)，其中KIT突变发生率最高，达到29.1%（25/86）；其次还有FLT3-ITD突变4例，FLT3-TKD突变4例，N-RAS突变5例，JAK2V617F突变2例，CBL突变1例；而K-RAS基因未发现突变，两组患者基因突变率差异无统计学意义(P>0.05)。残余正常中期分裂相对t(8;21)AML的CR率、RFS时间无明显影响，但对3年OS时间有不良影响（32%和55%； P=0.043）。结论：1、本组842例CBF-AML患者中， inv(16)/t(16;16)/CBFβ-MYH11发生率明显低于国外报道；t(8;21)AML常合并附加染色体异常，附加染色体异常的种类会影响t(8;21)AML的预后。2、用FISH和RT-PCR方法检测CBFβ-MYH11融合基因，能弥补常规核型检测的缺陷，而FISH是诊断inv(16)/t(16;16)AML较为准确和可靠地方法；+22异常易于识别，有预报inv(16)AML的价值。3、在CBF-AML患者中KIT基因突变发生频繁，KIT基因突变患者外周血白细胞数量高，且易复发、预后差；RAS基因突变发生率明显低于国外报道；JAK2V617F基因突变罕见。4、t(8;21)AML患者中存在残余正常中期分裂相与患者的临床特点、疗效有一定的相关性，是一个预后不良的因素。