泥鳅多糖抗氧化及抗蛋白质非酶糖基化活性研究

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目的研究泥鳅多糖的抗氧化及抗糖基化活性。方法从泥鳅身体中提取到水溶性多糖,并将全身多糖分成四个部分,分别命名为MAPⅠ、MAPⅡ、MAP Ⅲ和MAP Ⅳ;从泥鳅黏液中提取出水溶性多糖命名为MAP Ⅴ。对所得多糖组分进行了纯度鉴定、一般性质检查及分子量测定,并用H2O2/Fe2+体系法和邻苯三酚自氧化体系法研究了各多糖清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的抗氧化活性。通过NBT还原实验、二羰基化合物测定实验、非酶糖基化终产物(AGEs)的荧光性测定实验,以氨基胍为阳性对照,从糖基化反应的三个不同阶段分别测定各泥鳅多糖对糖基化的干预作用。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检验各泥鳅多糖的干预结果。结果结果表明,从泥鳅黏液、身体中分离提取到多糖,经UV扫描,无核酸(260nm)和蛋白质(280nm)特征吸收峰。IR扫描表明有典型多糖吸收峰。硫酸苯酚实验中,490nm处有明显多糖吸收峰。各MAP均有抗OH·和O2-·双重功效,且呈剂量依赖关系。在实验条件下,MAP Ⅳ清除OH·能力最强,清除率为26.1%,高于同浓度下阳性对照氨基葡萄糖的抑制率,低于同浓度下维生素C (Vc)抑制率;在加入多糖浓度浓度为5mg/mL时,MAP Ⅳ对O2-·显示了很强的清除能力,IC50为0.681mg/mL,强于阳性对照氨基葡萄糖,显示泥鳅多糖有良好的抗氧化性能。各MAP可以从糖基化反应的三个阶段来抑制AGEs的生成,且表现出很强的抑制作用,尤其对二羰基化合物的生成抑制作用显著,在浓度为200μg/mL时,MAP Ⅳ抑制率可达72.5%,明显强于阳性对照氨基胍(p <0.05n=5)。结论泥鳅多糖的抗氧化及抗糖基化功能与氨基葡萄糖的含量及多糖的分子量有关。本文表明泥鳅多糖可能为抑制糖尿病并发症的活性物质。根据糖尿病并发症的机制,泥鳅多糖有可能成为价廉、无毒的糖尿病并发症抑制或治疗药物。
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