【摘 要】
：
本试验通过体外分离培养马骨骼肌卫星细胞、鉴定以及氧化应激调控机理的研究,建立了马骨骼肌卫星细胞的培养体系以及氧化应激模型,阐明氧化应激的调控机理,为运动马的骨骼肌氧化应激调控提供科学依据和研究基础。本试验主要分为以下三个部分,试验一体外分离培养蒙古马骨骼肌卫星细胞并对获得的细胞进行鉴定。试验二选取可正常增值,生长状况良好的骨骼肌卫星细胞作为材料,利用H2O2来诱导骨骼肌卫星细胞产生氧化损伤,研究不
论文部分内容阅读
本试验通过体外分离培养马骨骼肌卫星细胞、鉴定以及氧化应激调控机理的研究,建立了马骨骼肌卫星细胞的培养体系以及氧化应激模型,阐明氧化应激的调控机理,为运动马的骨骼肌氧化应激调控提供科学依据和研究基础。本试验主要分为以下三个部分,试验一体外分离培养蒙古马骨骼肌卫星细胞并对获得的细胞进行鉴定。试验二选取可正常增值,生长状况良好的骨骼肌卫星细胞作为材料,利用H2O2来诱导骨骼肌卫星细胞产生氧化损伤,研究不同浓度的H2O2对骨骼肌卫星细胞的损伤情况,建立起骨骼肌卫星细胞的氧化损伤模型,并筛选出H2O2最佳诱导剂量和作用时间。试验三在建立骨骼肌卫星细胞的正常对照模型和氧化损伤模型的基础上,设计与Nrf2-ARE信号通路相关的基因引物,通过基因的相对表达量以及下游调控的抗氧化基因的表达情况,进而确定Nrf2-ARE信号通路调控蒙古马骨骼肌卫星细胞氧化损伤的机理。本研究得出以下结果:1.试验一:马骨骼肌卫星细胞培养及鉴定选取健康的2岁蒙古马,通过利用胶原酶和含0.25%EDTA的胰酶,两步酶消化法获得骨骼肌卫星细胞,将分离得到的细胞经细胞筛过滤去除直径偏大的杂细胞和细胞碎片,并利用差速贴壁法纯化肌卫星细胞,通过免疫荧光,Q-PCR.等方法对肌卫星细胞进行鉴定分析。本试验成功从肌肉组织中分离培养了蒙古马骨骼肌卫星细胞,经过分化培养液诱导可使细胞分化形成肌管,差速贴壁法的结果表明骨骼肌卫星细胞的贴壁时间长于马的成纤维细胞,骨骼肌卫星细胞的特异性表达基因与成纤维细胞相比表达差异显著。免疫荧光结果显示:肌卫星细胞的特异性抗体呈阳性表达,其中Pax7、Myod在细胞核内表达,desmin分布在细胞质中。2.试验二:马骨骼肌卫星细胞氧化应激模型的建立选取可正常增值且生长良好的肌卫星细胞作为材料,采用H2O2诱导肌卫星细胞产生氧化损伤,研究不同浓度的H2O2对肌卫星细胞的影响,并筛选出H2O2最佳诱导剂量和作用时间,以此建立起肌卫星细胞的氧化损伤模型,结果表明:H2O2对于细胞的活力损伤具有时间和剂量依赖性,结合H2O2对肌卫星细胞凋亡率、ROS含量和抗氧化指标的影响,可得出当H2O2作用浓度为600 umol/L,处理时间为6h时,骨骼肌卫星细胞产生了明显的氧化损伤,可作为构建肌卫星细胞氧化损伤模型的最佳条件。3.试验三:Nrf2-ARE通过介导马骨骼肌卫星细胞的氧化应激调控机理在建立骨骼肌卫星细胞的正常对照模型和氧化应激模型的基础上,设计与Nrf2-ARE通路相关的基因引物,通过基因的相对表达量以及下游调控抗氧化酶活,进而确定Nrf2-ARE信号通路调控蒙古马骨骼肌卫星细胞氧化损伤的机理。结果表明:H2O2损伤组的骨骼肌卫星细胞的Nrf2表达量与对照组细胞相比显著降低。Nrf2-ARE信号通路调控的抗氧化酶基因SOD1、SOD2、GPX1、GPX3、TrxR1的表达结果同样也是H2O2处理组低于对照组细胞。这些结果说明H2O2抑制了 Nrf2-ARE信号通路导致细胞产生氧化应激。
其他文献
随着互联网越来越发达,人与人之间的距离被无限拉近;通信行业的高速发展也使得大容量与高频率的信息交互成为可能。与此同时,人们日渐提高对信息图像化的诉求,数字化图片与视
对于量子计算,量子加密以及可扩展的光量子信息处理等领域的发展来说,高纯度,高全同性,高发光效率,且能够定向发射的集成固态单光子源是其中重要的一环。在其研发过程中,量子点-微腔耦合系统由于其高度的可操控性,可集成性以及巨大的发展潜力,成为了近二十年中的研究热点。该系统对于微腔的性能有数点要求,其中就包括了较小的有效模式体积。产生于金属纳米结构表面的局域表面等离激元由于具有可以突破光学衍射极限的极低模
科技发展的脚步越来越快,人类已经进入新的信息时代。而作为信息获取最重要和最基本的技术——传感器技术,也得到了极大的发展。具有感知能力、计算能力和通信能力的无线传感
直接带隙的有机无机杂化钙钛矿材料因具有非常优良的全波段光吸收率、优良的载流子传输性能、高的缺陷容忍度,在新型太阳能电池、LED等领域成为新能源领域的研究热点。基于有机无机杂化钙钛矿材料的单异质结钙钛矿太阳能电池(PSCs),光电转换效率(PCE)从2009年首次报道的3.8%,目前迅速跃升到的24.2%。钙钛矿太阳能电池的制备过程相对传统太阳能电池也更简单,能耗低,造价低廉,使得PSCs成为当前光
在金属表面(Ni、Cu等)催化生长是制备石墨烯的常用手段,但对石墨烯生长过程的观察还不够详细,使得对其生长机理的理解还不够深入。因此,对金属衬底上的石墨烯生长过程进行高空间和时间分辨的原位表征有助于人们完善石墨烯生长机制。本论文利用高分辨透射电镜和原位气相系统,实现了对纳米多孔金(NPG)表面石墨烯生长从初始到完成所有动态过程的原子尺度和毫秒时间分辨的原位观察,取得了一些有意义的成果。具体的研究成
北方泥炭沼泽是地球陆地生态系统重要的碳库和氮库,且对温度变化响应十分敏感。随着全球变暖的加剧,北方泥炭沼泽土壤碳、氮转化过程受到了直接或者间接的影响,从而对全球变
史料教学是一种重要的教学手段,现在很多的中学历史教师认可并使用此方法。很多优秀的教学案例都完美地体现着史料教学的特点和价值。新一轮高中历史课程改革将原来的三维目标提升发展为“学科核心素养”作为重要的育人目标。课堂中教学是新课程目标实现的重要方法途径,史料教学是课堂教学的重要环节,如何实践史料教学,将为实现核心素养目标迈出重要一步,也是新课改革的重要环节。所以,在把握历史学科核心素养的内涵与要求的前
中国是世界上人口最多的国家,也是劳动人口众多、劳动资源十分丰富的大国。如何利用中国庞大的人口和丰富的劳动力优势,实现劳动力资源的合理配置和优化,保持中国经济的高速稳定发展,对实现十九大提出决胜全面建成小康社会和中华民族伟大复兴的中国梦等具有重要的战略和社会意义。与此同时,农业转移人口能否实现全面市民化,在很大程度上与中国经济的可持续发展和未来在国际贸易格局竞争中的比较优势有关,这是影响中国未来经济
对文化衍生品进行设计创新,不但可以促进文化的传播,而且能够更好地带动国家文化经济产业的发展。但是目前文化衍生品设计的良莠不齐,提升空间还很大。本文通过对旋子彩画和陶瓷茶具结构的研究分析,从旋子彩画的文化寓意、艺术造型以及陶瓷茶具的结构合理性三个方向,对旋子彩画的陶瓷茶具衍生品进行设计开发研究。首先查阅相关资料文献,调查分析旋子彩画的符号特征以及文化意义,运用形状解构法对旋子彩画造型结构展开分析并归
“高周转”,伴随着房地产企业的扩张,是近年最热门的词语之一,它要求房地产企业要加快资金的高速周转,加速每一个投资项目的建成,尽快实现项目收益产出,并将收益产出投入到新的投资项目中去。同样作为一个重资产的行业,电力企业在国内经济“新常态”下,也不得不从无视成本、收益地、粗暴地投资扩张,转向面对如何实现“高周转”的问题。在电网企业投资建设的项目中,覆盖面最广的就是配电网项目,尤其是10k V配电线路建