反复发作偏头痛实验动物模型的建立及鉴定

来源 :中国人民解放军军医进修学院 解放军总医院 解放军医学院 军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:justinviva
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目的: 制备反应可靠的偏头痛反复发作的动物模型,为偏头痛等血管源性头痛的发病机制、治疗药物和手段的研究提供实验基础。 方法: 体重为2~4kg的短毛猫12只,随机分为反复刺激组(n=4)、急性刺激组(n=4)、假手术对照组(n=4)三个组。实验动物以兽用速眠新Ⅱ(846合剂,0.1ml/kg,im)麻醉后,用电钻钻开颅骨,暴露SSS,安放并固定不锈钢套管。假手术对照组不予电刺激,手术后恢复一周,手术后第8天灌注固定,并取脑干及上颈髓;反复刺激组手术后一周,以单刺激脉宽为250μs、电流1.5mA、频率3Hz的方波电流刺激清醒状态下猫SSS区硬脑膜一周,每天2小时,第8天刺激结束后1小时灌注固定,并取脑干及上颈髓;急性刺激组手术后恢复一周,第8天以同样方波刺激清醒状态下猫SSS区硬脑膜2小时,休息1小时后灌注固定,并取脑干及上颈髓,应用免疫组化技术,行延髓和上颈髓冰冻切片c-fos蛋白及nNOS染色。 结果: c-fos及nNOS免疫反应阳性神经元主要位于延髓三叉神经脊束核尾侧部浅层和C1、C2后角的Ⅰ、Ⅱ层。在孤束核和中央导水管周围X层也有免疫反应阳性神经元表达。假手术对照组动物免疫反应阳性神经元较少;急性刺激组和反复刺激组免疫反应阳性神经元较假手术对照组明显增多;急性刺激组和反复刺激组免疫反应阳性神经元数无显著差异。 结论: 刺激SSS区硬脑膜可激活在偏头痛痛觉中枢传递中起重要作用的三叉神经二级神经元;反复电刺激猫SSS区硬脑膜是否增加三叉神经二级神经元的兴奋性尚不明确,还有待于进一步研究;反复电刺激清醒状态下猫SSS区硬脑膜可作为研究偏头痛等血管源性头痛的病理生理机制、防治药物和方法的较为稳定可靠的动物模型。
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