论文部分内容阅读
目的：通过化学萃取同种异体神经，去除髓鞘和雪旺细胞，形成无细胞基膜管后桥接鼠坐骨神经缺损，研究神经再生效果。 方法：健康SD大鼠30只，Wistar大鼠20只，雌雄不分，体重200～220g。将Wistar大鼠左侧坐骨神经切取25mm后，随机选择10条坐骨神经，用溶血磷酯酰胆碱、叠氮钠等试剂组成的非变性生物剂处理，得到无细胞的基膜管。另10条坐骨神经不作任何处理。动物经20％乌拉坦腹腔注射麻醉后，左侧大腿后外侧切口，在距坐骨神经出口1cm以远处用双面刀片切断坐骨神经，造成20mm的神经缺损。将动物随机分为三组，每组10只，A组实验组：将制备好的无细胞基膜管支架放置于神经断端，用10-0显微缝合线在显微镜下缝合两断端；B组对照组Ⅰ：自体神经移植组，将切取的自体神经按A组方法原位缝合于神经两断端；C组对照组Ⅱ：异体神经移植组，将未经处理的异体坐骨神经缝合于神经两断端，方法同前。术后8周、12周用肌电图仪检测手术侧再生神经运动诱发电位潜伏期及波幅变化；12周时分别取材，作HE染色、亚甲基蓝-碱性品红染色，光镜下观察有髓神经纤维结构；用电脑图像分析处理系统对亚甲基蓝-碱性品红染色标本进行图像分析，记数有髓神经纤维数目、轴突直径及髓鞘厚度；一部分作电镜取材，在日立透射电镜下观察再生神经超微结构。 结果：1．动物一般观察 异体神经移植组在术后1周，所有动物均出现足部红肿、溃疡、脱趾，12周后仍未愈合。无细胞基膜管移植组(A组)及自体神经移植组(B组)术后2周各有3只及2只开始出现溃疡，其余动物仅出现红肿，12周时均已愈合。术后12周用针和盛70℃水的试管刺激患肢足趾部，A、B两组均出现肢体屈曲、回缩反应，C组则未出现此反应。术后8周及12周取材时，发现异体神经移植组局部粘连严重，并伴有渗液，未见神经纤维连接缺损。A、B组粘连较轻，外观与正常神经相似。2．肌电图测量及分析 术后2月电生理检测再生神经的潜伏期及波幅，A组分别为3.37±0.54ms、13.82±1.73mv，B组分别为2.82±0.49ms、17.45±1.51mv，A组低于B组(p＜0.05)，3个月时A组潜伏期及波幅分别为2.74±0.49ms、19.02±2.32mv，B组分别为2.32±0.46ms、21.04±1.09mv，A、B两组无显著性差异(P＞0.05)。C组仅见瘢痕组织，无神经纤维再生连接缺损处，无法进行检测。3．亚甲基蓝-碱性品红染色及电镜观察 两组均见再生神经纤维呈束状分布，有多个神经束，每一个神经束内见大量密集、粗大的有髓神经纤维，神经束之间充满增生的胶原，未见瘫痕形成，再生血管散在分布。电镜下，A组可见有髓神经纤维及无髓神经纤维再生明显，排列规则，轴突粗大，再生轴芽被雪旺细胞包裹，髓鞘较厚，与B组结果相似。4.轴突图像分析用电脑图像分析处理系统对亚甲基蓝一碱性品红染色标本进行图像分析，术后3个月A组有髓神经纤维数目、直径及髓鞘厚度分别为2904士410.82个、3.63士0.43林m、0.83士0.13林m;B组分别为3113.00士390.04个、3.97士0.32娜、1.32士0.24娜。A组的髓鞘厚度在术后3个月时低于B组，有显著性差异(P<0.05)。A、B两组轴突直径及数目无显著性差异。 结论:这种无细胞基膜管移植体能支持轴突的生长和雪旺细胞的迁移，是一种良好的神经移植替代材料。