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目的对铁棒锤非生物碱活性部位化学成分进行分离,并对分离得到的单体化合物进行T细胞抑制作用的初步筛选,为寻找铁棒锤抗类风湿性关节炎药物的物质基础提供实验数据,为该药材抗类风湿性关节炎作用机制的深入研究奠定基础。方法1.采用溶剂法对铁棒锤进行提取,利用大孔吸附树脂、阳离子交换树脂技术对铁棒锤非生物碱活性部位进行富集。2.通过硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、MCI柱色谱、凝胶柱色谱、制备薄层等多种分离手段,对铁棒锤非生物碱活性部位进行系统分离,利用现代波谱技术进行单体化合物的结构鉴定。3.通过MTT法观测铁棒锤非生物碱活性部位及分离得到的单体化合物对Jurkat细胞增殖反应的影响。结果1.铁棒锤干燥块根10kg经提取后得到粗提浸膏0.8kg,大孔吸附树脂富集到30%醇部位93.3g,得率为11.6%;30%醇部位通过阳离子交换树脂分离,得到非生物碱活性部位46.7g,得率为50.1%。2.对铁棒锤非生物碱活性部位系统分离得到12个单体化合物。通过1H-NMR鉴定出6个化合物的结构。化合物Ⅰ:邻苯二甲酸二-(2-乙基)-己基酯(Di-(2-ethylhexyl)phthalate);化合物Ⅱ:(2E)-3-[4-(β-D-吡喃葡萄糖苷)-苯基]-丙烯酸((2E)-3-[4-(β-D-glucopyranoside)-phenylacrylic]-acid);化合物Ⅲ:十五碳酸(pentadecanoic acid);化合物Ⅳ:蒙花苷(linarin);化合物Ⅴ:β-谷甾醇(β-sitosterol);化合物Ⅵ:5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl furfural).3.铁棒锤非生物碱活性部位4mg/ml、2mg/ml和1mg/ml浓度下有显著抑制Jurkat细胞增殖的作用(P<0.05);化合物Ⅰ在2mg/ml、0.5mg/ml、0.125mg/ml、0.031mg/ml、0.0078mg/ml浓度下均有显著抑制Jurkat细胞增殖的作用(P<0.05);化合物Ⅱ在2.6mg/ml、1.3mg/ml、0.75mg/ml、0.375mg/ml浓度下有显著抑制Jurkat细胞增殖的作用(P<0.05);化合物Ⅲ只在1.98mg/ml浓度下有显著抑制Jurkat细胞增殖的作用(P<0.05);化合物Ⅳ在2mg/ml、0.5mg/ml、0.125mg/ml、0.031mg/ml浓度下均有显著抑制Jurkat细胞增殖的作用(P<0.05);化合物Ⅵ在1.92mg/ml、0.96mg/ml、0.48mg/ml浓度下有显著抑制Jurkat细胞增殖的作用(P<0.05)。结论1.利用大孔吸附树脂、阳离子交换树脂技术富集得到铁棒锤非生物碱活性部位46.7g2.从铁棒锤非生物碱活性部位分离得到6个单体化合物。一个酯类化合物(CompoundⅠ);两个酸类化合物(CompoundⅡ、CompoundⅢ);一个黄酮类化合物(CompoundⅣ);一个甾体类化合物(CompoundⅤ);一个醛类化合物(CompoundⅥ)。其中化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅵ为首次从该植物中分离得到的单体化合物。3.铁棒锤非生物碱活性部位、化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ、化合物Ⅳ、化合物Ⅵ均可抑制Jurkat细胞增殖反应。