圈卷产色链霉菌次级代谢产物生物合成基因簇的挖掘

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sycamorelee
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
圈卷产色链霉菌7100染色体的454高通量测序获得了2,321,457个reads。这些平均长度为387 bp的reads的Newbler2.6拼接获得了一个长度大约为9 Mb,含有1,299个contigs和G+C含量为72.2%的基因组草图。这些contigs的平均长度为7,229 bp;最长的contig长度为74,262 bp;最短的contig长度为500 bp。由于次级代谢产物生物合成基因簇长度在10 kb-200kb之间,所以单个次级代谢产物生物合成基因簇断裂成多个序列片断,并随机散布于基因组草图中。由于目前已发表的次级代谢产物生物合成基因簇预测工具,如antiSMASH、Clustscan、NP.searcher和SBSPKS等都是针对完全测序的基因组,因此基因组草图中次级代谢产物生物合成基因簇的生物信息学预测往往得不到理想的结果。  本研究利用基因簇预测工具antiSMASH结合BLAST分析,随后进行基因组文库筛选及Gap填补的方法,在圈卷产色链霉菌基因组框架中一共挖掘到了35个次级代谢产物生物合成基因簇。除尼可霉素生物合成基因簇外,其余34个基因簇所对应的次级代谢产物未得到分离与鉴定。将这34个次级代谢产物生物合成基因簇的序列与NCBI核酸序列数据库中的已知基因簇序列进行比对。结果表明:与NCBI核酸序列数据库中的已知基因簇序列一致性在80%以上的有14个,30%-50%之间的有9个和30%以下的有11个。为了研究这些次级代谢产物生物合成基因簇的转录情况,本论文工作选用了三种培养基SP、SMMS和R5对圈卷产色链霉菌进行了发酵,并选取了48 h、96 h和120 h三个时间点对35个基因簇在以上三种培养基中的转录情况进行了分析。结果表明:1.17个基因簇在三种培养基中都转录;3个基因簇在一种或两种培养基中转录;15个基因簇在三种培养基中都不转录;2.在不同的培养基中,基因簇的转录丰度不同。15个在三种培养基中均不转录的基因簇被定义为隐性基因簇。根据序列分析结果,本论文工作选取了nrps2和pks-nrps1两个隐性基因簇作为研究对象进行激活。nrps2基因簇的激活主要采用了调控基因的遗传操作策略,分别构建了 or f22和or24/25基因的过表达菌株(7100-hrdBorf22和7100-hrdBorf24/25)和orf25基因的缺失突变株(△orf25)。但是,野生型菌株与突变株发酵液的生物活性检测与HPLC图谱分析未发现明显的差异。pks-nrps1基因簇的激活主要采用了基因簇的异源表达策略,构建了含有pks-nrps1基因簇的整合型质粒(pPKS-NRPS1),并将其导入M145,M1146,M1152和M1154异源宿主中。但是,发酵液的生物活性检测和HPLC图谱分析均未检测到异源菌株与宿主菌株之间的差异。
其他文献
在世界范围内,玉米生产频繁受到水资源短缺的威胁,所以进行玉米耐旱性的遗传改良的研究尤为重要。研究证明,当植物感受到水分胁迫时,DREB类转录因子对调控胁迫响应基因的表达起着
网格蛋白介导的内吞作为物质进入细胞的一种主要方式,它通过调节细胞膜表面受体活性参与多种信号转导过程。因此,网格蛋白介导的内吞对高等真核生物的生命活动是至关重要的。植
学位
本试验以唐菖蒲切花(Gladiolus hybridus Hort)(“粉秀”品种)为试验材料,主要研究了含KT的处理液对唐菖蒲切花的保鲜效果,并结合蔗糖和6-苄氨基腺嘌呤的保鲜作用,探讨了唐菖
本文通过对荣华二采区10
目的 对比单节段颈前路减压植骨融合内固定(ACDF)术后留置引流与否的安全性和临床结果 .方法 将2017年1月至2018年6月行单节段ACDF术且符合选择标准的100例患者进行前瞻性研
很多希望大力发展可再生能源的国家对风能,特别是离岸风能的开发和利用十分重视。随着半导体技术的发展,高压直流(HVDC)技术被广泛应用于将风电从离岸风电场传输到陆上电网。高压直流输电技术的应用可以通过多种方式改善电力系统性能,如提高运行安全性,增强可靠性和经济性。随着HVDC技术使用量的增加,HVDC的可靠性表现在整个电力系统的可靠性方面起着重要的作用。虽然HVDC传输系统的可靠性已经被研究了一段时
学位
学位
学位