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本研究采用RNA干扰策略对这两个基因在卵巢癌中的作用进行了研究。为能长时间阻遏靶基因的表达,我们采用质粒型表达载体pSilencerTM2.1U6-neo表达siRNA。针对RABEX5和RAB5A分别各自构建3个质粒型表达载体,分别转染HO-8910PM细胞,成功建立了稳定转染上述表达载体的细胞系。同时还稳定转染pSilencer阴性对照质粒作为RNA干扰实验的阴性对照。我们用实时定量PCR和蛋白印迹方法对靶基因的表达进行检测,选择抑制效果最好的表达载体并用荧光免疫化学方法证实后用于下一步功能研究。
本文研究结果提示卵巢癌组织和正常卵巢组织在细胞周期调节、DNA损伤修复、胞吞和内体融合、基因转录和翻译以及细胞免疫反应等方面可能存在差异。RAB5A信号传导通路在卵巢癌转移过程中具有一定调控作用。RAB5A作为一种类似拮抗粘合素的GTP酶,可能通过影响细胞骨架的重组和调控细胞内吞作用,影响细胞的活动和粘连,从而参与卵巢癌浸润转移过程的调控;RAB5A也可能通过调控细胞凋亡途径参与肿瘤转移过程。RABEX5基因作为RAB5A基因的核苷酸交换因子之一,可能是通过RAB5A途径在肿瘤中起作用。RAB5A有望成为卵巢癌治疗的分子靶点。